颈动脉粥样硬化不稳定性斑块与胆汁反应的初步研究

发布时间：2018-11-10 17:03

【摘要】：目的:研究颈动脉粥样硬化不稳定性斑块在酸性条件下与胆汁发生的软化溶解反应,分析测定反应前后斑块成分的改变。方法:第一部分,验证颈动脉粥样硬化不稳定性斑块与胆汁在酸性条件下发生的溶解现象:通过颈动脉内膜剥脱术收集颈动脉粥样硬化斑块,根据斑块的成分将其分为不稳定性斑块与稳定性斑块两类,并将每类斑块分成3组,在25℃的实验条件下,分别加入胆汁(PH≈7),稀盐酸(PH=2),酸化后的胆汁(PH=2),观察并记录各组斑块的溶解情况。第二部分,使用气相色谱联合质谱的方法研究反应前后斑块成分的改变:分别将反应前不稳定性斑块的脂质坏死核心和反应后生成的墨绿色絮状物质进行成分测定,对比分析二者之间成分的差异。第三部分,使用考马斯亮蓝法联合质谱的技术测定反应前后斑块中蛋白质成分的改变:分别将反应前后的样本进行蛋白提取、浓度测定、酶解后行质谱检测,对比反应前后样本中蛋白质成分的改变。结果:1.只有酸化后的胆汁(PH=2)可以与颈动脉粥样硬化不稳定性斑块发生明显的溶解反应,稀盐酸(PH=2)和普通胆汁(PH=7)与颈动脉粥样硬化不稳定性及稳定性斑块均无明显反应。2.颈动脉粥样硬化斑块的分类中,只有不稳定性斑块能够与酸化后的胆汁发生明显的溶解反应。3.不稳定性斑块与酸化后的胆汁发生的溶解反应中,可见不稳定性斑块的脂质坏死核心在酸化后的胆汁作用下迅速软化溶解,最终转化成为一种墨绿色絮状物质。4.气相色谱联合质谱法可测得反应前后样本中糖、酸、醇、酯等较小分子量物质成分的变化。最终测得反应前的脂质坏死核心中有小分子物质11种,反应后生成的絮状物质中则有50种,对比发现消失了 5种,新生成了 44种。5.考马斯亮蓝法联合质谱的技术可测得反应前后样本中大分子蛋白成分的改变。最后测得反应前的脂质坏死核心中有蛋白416种,反应后的生成物中则有191种,对比发现消失了 285种,新生成了 60种。结论:1.颈动脉粥样硬化不稳定性斑块与酸性条件下的胆汁(PH=2)发生的溶解现象,实质是斑块中的脂质坏死核心与酸化后的胆汁反应,最终软化溶解成为一种墨绿色絮状物质。2.脂质坏死核心体积占比较大的不稳定性斑块在酸化后的胆汁中溶解效果显著,此现象有望为不稳定性斑块的血管介入治疗提供新方法。3.气相色谱联合质谱法可用于脂质坏死核心和反应后生成的墨绿色絮状物质中糖、酸、醇、酯等较小分子物质的对比测定。4.考马斯亮蓝法联合质谱的技术可适用于反应前后样本中大分子蛋白质成分的对比测定。5.不稳定性斑块的脂质坏死核心和反应后生成的絮状物质的成分均极其复杂,研究颈动脉粥样硬化不稳定性斑块与胆汁在酸性条件下反应的关键机理是一项复杂的工作,需要经过大量的实验、修改、调整,并且需要神经外科、肝胆外科、生物化学专家等不同学科研究人员的密切合作。
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【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R543.4

【参考文献】