microRNA相关基因遗传多态性与冠心病临床关联及预后研究

发布时间：2018-11-19 16:50

【摘要】：第一部分micro RNA相关遗传多态性与血压、血糖、血脂等临床特征相关性研究【目的】大量研究显示,mi RNA相关基因多态性不仅与复杂疾病的易感性密切相关,同时也影响血脂等临床特征。本研究目的是检验6个mi RNA相关基因多态(mi R-149 rs71428439、mi R-146a rs2910164、mi R-499 rs3746444、mi R-423rs6505162、mi R-4513 rs2168518和FABP2 rs11724758)与中国汉族人群冠心病(coronary artery disease,CAD)临床特征的关联性。【方法】利用连接酶检测反应(ligase detection reaction,LDR)-PCR技术分型1004例冠心病6个SNP位点(mi R-149 rs71428439、mi R-146a rs2910164、mi R-499rs3746444、mi R-4513 rs2168518、mi R-423 rs6505162和FABP2 rs11724758)的基因分型,统计分析SNP与冠心病患者的血压、血脂、血糖等临床特征的关联。【结果】除FABP2 rs11724758位点外(p0.05),其余5个SNP位点的基因型分布均符合HWE(p0.05),因此将不符合HWE的FABP2 rs11724758剔除。统计分析发现,mi R-4513 rs2168518与血压、甘油三酯、总胆固醇、空腹血糖水平及糖尿病合并症相关(p0.05)。mi R-499 rs3746444及mi R-423 rs6505162分别与血压、高密度脂蛋白水平关联(p0.05)。【结论】mi R-4513 rs2168518、mi R-499 rs3746444及mi R-423 rs6505162与冠心病患者血压、血脂、血糖等多个临床特征密切相关。第二部分micro RNA相关基因多态性与冠心病的预后研究【目的】mi RNA基因上的遗传变异可能会影响mi RNA功能,进而导致疾病,并影响其预后。本研究的目的是检测mi RNA基因多态性与中国汉族冠心病患者的预后关联。【方法】本研究采用前瞻性研究的方法,对2009-2014年1004名冠心病患者进行随访。本次随访研究以首次主要心血管不良事件(major cardiovascular event)[心肌梗塞(myocardial infarction,MI)、中风、心力衰竭、血管再通(recanalization)、冠状动脉旁路移植术(coronary artery bypass grafting)、心脏骤停复苏(resuscitated cardiac arrest)和死于心血管病]为队列研究的主要研究终点,次要研究终点为任何原因死亡。截至2014年共记录主要心血管不良事件244例(24.3%),平均随访4.86年。利用Kaplan-Meier法和log-rank检验进行生存分析,Cox回归模型分析mi RNA相关基因多态性对冠心病患者预后的影响。【结果】生存分析显示mi R-499 rs3746444和mi R-4513 rs2168518与冠心病无事件生存期显著相关(p0.05)。mi R-499 rs3746444的GG基因型在显性遗传模型(校正HR=1.913,95%CI:1.162-3.152,p=0.011)和隐性遗传模型(校正HR=1.954,95%CI:1.197-3.192,p=007)下,均与冠心病患者较短的无病生存时间显著相关。mi R-4513 rs2168518在共显性遗传模型(CT vs TT,校正HR=1.345,95%CI:1.022-1.770,p=0.034;TT vs CC,校正HR=1.714,95%CI:1.077-2.729,p=0.023)、显性遗传模型(校正HR=1.401,95%CI:1.079-1.819,p=0.011)和加性遗传模型(校正HR=1.323,95%CI:1.084-1.615,p=0.006)下,与升高的主要心血管不良事件风险显著相关。此外,mi R-4513 rs2168518是冠心病总生存时间的独立预后生物标志物(显性模式,校正HR=2.307,95%CI:1.486-3.584,p0.001;隐性模式,校正HR=2.121,95%CI:1.126-3.955,p=0.020;加性模式,校正HR=1.855,95%CI:1.367-2.517,p0.001)。mi R-149rs71428439 GG基因型与冠心病患者较短的总生存时间显著相关(校正HR=1.821,95%CI:1.008-3.290,p=0.047)。【结论】mi R-4513 rs2168518、mi R-499 rs3746444可能是冠心病预后评估的风险因子。第三部分冠心病患者血清micro RNA表达分析【目的】micro RNA(mi RNA)是一类可负性调控基因表达的非编码小RNA,在冠心病等复杂疾病的发生、发展中扮演着重要的角色。本研究目的是观察冠心病血清中异常表达的mi RNA及其表达水平变化趋势。【方法】应用实时荧光定量PCR(quantitative reverse transcriptase PCR,q RT-PCR)技术检测86例对照组及86例冠心病血清样本中mi R-149、mi R-146a、mi R-499、mi R-4513和mi R-423共5个mi RNA前体(pre-mi RNA)及成熟体的表达情况,筛选经表达分析鉴定后有统计学表达差异的mi RNA。【结果】q RT-PCR结果表明,与正常对照组样本相比,候选的5个pre-mi RNA中,血清pre-mi R-146a和pre-mi R-499表达水平显著发生改变,其中pre-mi R-146a表达上调(fold change=2.75,p=0.025),pre-mi R-499表达下调(fold change=2.14,p=0.031),而pre-mi R-149、pre-mi R-4513和pre-mi R-423在冠心病组和对照组中的血清表达水平未见明显差异(p均0.05)。并且,血清mi R-146a在冠心病患者中显著上调(fold change=1.96,p=0.039),而血清mi R-499表达显著下调(fold change=2.02,p=0.042)。血清mi R-149、mi R-4513和mi R-423表达水平在对照组和冠心病组之间无明显差异(p均0.05)。【结论】血清pre-mi R-146a、pre-mi R-499、mi R-146a和mi R-499在冠心病患者中表达异常,可能是冠心病标记物。
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【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R541.4

【参考文献】