uPAR促进单核细胞分化及摄取ox-LDL的作用和机制研究

发布时间：2019-05-10 06:39

【摘要】：研究背景：尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR),是单核细胞等浸润性细胞表达的一种细胞表面受体。uPAR参与了多种病理和生理过程。在动脉粥样硬化斑块内存在促炎性经典激活的巨噬细胞M1和抑炎性替代激活的巨噬细胞M2,而uPAR在这两种巨噬细胞亚型中均有表达。CD36是介导巨噬细胞摄取ox-LDL的主要受体。而研究发现CD36与uPAR共定位在动脉粥样硬化斑块内的泡沫细胞中。也有研究显示肿瘤细胞高表达的uPAR可促进巨噬细胞向M2亚型分化。细胞实验显示他汀类药物可降低巨噬细胞uPAR表达,并使巨噬细胞摄取ox-LDL能力下降。研究目的：本研究旨在探索血浆LDL-C浓度与单核细胞表面uPAR表达水平的关系,并进一步明确uPAR对巨噬细胞分化和摄取LDL-C的影响。研究方法：本研究通过高脂饮食喂养apoE(-／-)小鼠建立高脂血症小鼠模型,并通过他汀干预血脂的水平,使用流式细胞检测的方法来测定外周血单核细胞uPAR表达水平。利用转基因技术建立高表达和低表达uPAR的巨噬细胞系。在dil-ox-LDL的刺激下,观察巨噬细胞炎症特性,测定CD36、IL-1β、TNF-α、CD206、arginase-1及IL-10mRNA表达。并用激光共聚焦显微镜观察细胞摄取脂质的能力。研究结果：1、高脂血症小鼠模型中,血浆LDL-C水平与外周血单核细胞uPAR表达水平呈显著的正相关(r=0.5527, p0.0001)。阿托伐他汀降低血浆LDL-C水平的同时下调uPAR表达。2、动脉粥样硬化斑块内M1和M2巨噬细胞分布不同,但细胞内均有uPAR表达。3、高表达uPAR的THP-1细胞(UOT)在没有刺激时,表现为典型的M2巨噬细胞特征,即抑炎因子(CD206、arginase-1和IL-10,p0.05)表达上调且炎症因子(IL-1β和TNF-α, p0.05)表达受抑制。4、UOT细胞在ox-LDL刺激下转化为M1巨噬细胞,即抑炎因子(CD206、arginase-1和IL-10,p0.05)表达水平下降的同时炎症因子(IL-1β和TNF-α, p0.05)表达水平升高。5、WTT细胞受到ox-LDL刺激后,抑炎因子(CD206、arginase-1和IL-10,p0.05)及促炎因子(IL-1β和TNF-α, p0.05)均升高。且炎症因子升高的程度小于UOT细胞。6、UOT细胞摄取dil-ox-LDL的能力比WTT细胞强,表现为：开始摄取dil-ox-LDL的时间早、相同观察时间点荷脂细胞百分比高且细胞荷脂量大。7、相同时间点低表达uPAR的THP-1细胞(ULT)荷脂量小于WTT细胞。8、无ox-LDL刺激时,UOT细胞表达CD36的水平低于WTT细胞。有ox-LDL刺激时结果相反。研究结论：外周血LDL-C与uPAR表达水平正相关。uPAR的高表达可使巨噬细胞向M2亚型分化,可能是通过调节CD36表达而参与巨噬细胞摄取LDL的过程。
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【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R543.5

【参考文献】