非罪犯冠状动脉粥样硬化病变进展与年龄关系及其表观遗传学研究

发布时间：2019-07-15 08:14

【摘要】：目的：niRNALet-7家族是最早在线虫体内发现的miRNA之一,人类miRNALet-7包含12个成员,它们在肿瘤、干细胞生物学、衰老和代谢等许多领域的功能都引起了重视。最近的研究发现其成员在心血管系统中高度表达,其中let-7i在冠心病患者中的表达明显下降,let-7i和和TLR4的表达水平明显负相关,let-7i主要是通过负向调节TLR4,进而抑制TLR4信号通路来减少促炎因子和趋化因子如TNF-α、IL-6、IL-8、IL-12等的生成及释放,从而延缓冠状动脉粥样硬化的发生与发展,提示TLR4可能对动脉粥样硬化过程有促进作用。DNA甲基化可以通过改变DNA的空间形态,从而抑制DNA与相关蛋白结合能力,抑制相关基因的转录进而抑制其表达。目前有关动脉粥样硬化病变进展的研究较少,我们课题组前期的MicroRNA芯片及基因芯片筛选发现：niRNA let-7i在冠心病的病变进展组明显降低,TLR4基因启动子甲基化在病变进展组也明显降低,miRNA let-7i可能与动脉粥样硬化相关,同时我们认为nicroRNA let7i的靶向目标TLR4基因甲基化也可以通过降低TLR4的表达而参与冠心病非罪犯斑块进展,为此,我们通过选取249例冠心病两次造影患者,明确其血浆niRNA let-7i及TLR4基因甲基化与斑块进展相关性,为进一步了解斑块进展的机制提供方向,为冠心病的治疗提供新的作用靶点提供依据。方法：①.选取2010年8月1日至2013年5月31日间行支架植入术后12个月左右行CAG复查并保存有血样的冠心病患者249例,3D-QCA分析所有入选患者两次造影结果直径狭窄率,选取进展程度最大的非罪犯冠状动脉粥样硬化病变(No-culprit coronary lesion,NCCL)作为目标病变,非罪犯病变(NCCL)进展经定义为：(1)原直径狭窄50%以上(含50%)的病变复查造影直径减少大于等于10%；(2)原直径狭窄小于50%的病变直径减少大于等于30%；(3)在原先正常的冠脉节段出现了新的直径狭窄大于等于30%的病变；(4)原病变进展为完全阻塞。根据病变进展的定义将其分为进展组与非进展组；②.RT-PCR检测249例患者血浆中MicroRNAlet-7i水平,比较进展组与非进展组循环MicroRNAlet7i差异③.提取249例患者的DNA,经硫酸氢盐硫化,PCR扩增硫化后待检测基因,焦磷酸测序检测所有患者的甲基化水平,比较进展组和非进展组TLR4基因甲基化水平差异。结果：非罪犯冠状动脉斑块进展组血浆中MicroRNA Let-7i (1.39±1.82 vs 3.09±5.03,P=0.019)明显低于非进展组。非罪犯冠状动脉粥样硬化斑块进展组MicroRNA Let-7i靶基因TLR4基因启动子区甲基化率明显低于非进展组(9.78±3.38 vs 12.95±5.23,P0.001)。结论：血浆中MicroRNA Let-7i降低与冠状动脉粥样硬化病变进展明显相关。MicroRNALet-7i靶基因TLR4启动子区甲基化降低与冠状动脉粥样硬化病变进展明显相关。MicroRNAlet-7i及TLR4基因甲基化可以抑制动脉粥样硬化的进展。目的：冠心病主要在老年人中出现,但是也有一年轻人罹患该类疾病。已经有报道7-10%的心肌梗死为小于45岁年轻患者。年轻冠心病患者的冠心病危险因素与其他年龄段冠心病患者相同,但是年轻冠心病患者个体多有多个危险因素,吸烟和血脂异常是年轻冠心病患者常见的相关危险因素。许多研究证实年轻冠心病患者的预后要好于年老冠心病,然而也有一些研究对冠心病患者进行了长期预后随访,发现冠心病患者15年总死亡率为30%,而年轻冠心病患者为45%,相关研究的结果明显不相同,年轻冠心病仍然有很多问题需要我们去研究。年轻冠心病患者发病年龄早,生存周期长,是一类比较特殊的群体,目前为止,有关年轻冠心病患者冠脉斑块进展速度的研究较少,年轻冠心病发病年龄早,其动脉粥样硬化斑块进展速度是否快于非年轻冠心病患者,目前未见有相关研究,本文为回顾性观察研究,主要研究年轻冠心病患者与非年轻冠心病患者斑块进展速度的差异。方法：选取2008年1月至2013年5月曾经在我院行经皮冠状动脉介入手术同时复查冠脉造影的冠心病患者共848名。3D-QCA分析所有入选患者两次造影结果直径狭窄率,选取进展程度最大的冠状动脉非罪犯病变(No-culprit coronary lesion,NCCL)作为目标斑块,非罪犯病变(NCCL)进展经3D-QCA测量并定义为：(1)原直径狭窄50%以上(含50%)的病变复查造影直径减少大于等于10%;(2)原直径狭窄小于50%的病变直径减少大于等于30%;(3)在原先正常的冠脉节段出现了新的直径狭窄大于等于30%的病变;(4)原病变进展为完全阻塞。根据病变进展的定义将其分为进展组与非进展组,①将年轻冠心病(45岁)作为病变进展危险因素引入回归分析,COX回归比率模型分析病变进展的独立危险因素,绘制风险模型；②根据第一次造影年龄将冠心病患者分为年轻冠心病(45岁)和非年轻冠心病(≥45岁)两组,Kaplan-Meier去估计两组患者的两组患者的无斑块进展事件存活率,绘制生存曲线；绘制两组患者两次造影间直径狭窄率的累积曲线,比较两次造影两组患者的病变累积曲线的不同;分析年轻冠心病患者及非年轻冠心病两组患者的临床特征及危险因素差异,寻找年轻冠心病患者造成病变进展率较快的原因。结果：①.两次造影平均时间为10.79月,136(16.0)名患者非罪犯冠状动脉粥样硬化病变呈现进展。进展组患者男性比率较高(88.2%vs.80.1%,p=0.03),ST段抬高性心肌梗死患者较多(39.0%vs.13.5%,p0.001),年轻患者的比率明显高于非进展组(19.9%vs.10%,p=0.002)。斑块进展组患者初次造影时的直径狭窄百分值明显小于非进展组(32.21±13.24%vs.35.03±13.01%,p=0.021),病变进展组的最小管腔面积大于病变非进展组(3.41±2.08 mm2 vs.3.99±2.75 mm2,respectively;p.0.018)。初次造影时,非罪犯病变进展组和非进展组所有的血脂指标无显著的差异,第二次造影时,进展组患者血浆低密度脂蛋白水平高于非进展组(2.24±0.85 mmol/L vs 2.10± 0.75 mmol/L;P=0.046):进展组患者高密度脂蛋白水平明显低于非进展组(1.01±0.27 mmol/L vs 1.07±0.30 mmol/L;P=0.027)。其他临床指标无明显差异。②多变量COX回归分析显示发病年龄早(45岁)及心肌梗死是非罪犯冠状动脉病变进展的独立危险因素。与非年轻冠心病患者(45岁)相比,年轻冠心病患者的风险比为(Crude Hazard Ratio)为2.17(95%CI 1.42-3.30；P0.001),经调整性别、ST段抬高性心肌梗死、体重指数,舒张期及收缩期血压,血脂水平,快速血糖,吸烟,饮酒,高血压,家族心脏病史,糖尿病,药物使用和斑块特征后,调整后风险比(adjusted HR)仍然具有显著意义,为1.70(95%CI 1.06-2.72；P=0.029)：心肌梗死为病变进展的另外一独立危险因素,首次造影为ST抬高性心肌梗死的患者(STEMI)与首次造影为非ST抬高性心肌梗死患者相比,其非罪犯病变(NCCL)进展的风险比(Crude Hazard Ratio)为2.83(95%CI 2.00-3.99;P0.001),经调整性别、ST段抬高性心肌梗死、体重指数,舒张期及收缩期血压,血脂水平,快速血糖,吸烟,饮酒,高血压,家族心脏病史,糖尿病,药物使用和病变特征后,其风险比仍具有显著意义为2.62(95%CI 1.79-3.84；P0.001);Kaplan-Meier生存曲线显示年轻冠心病患者的无病变进展事件存活率明显低于非年轻冠心病患者。③所有患者中有98位年龄小于45岁,与非年轻冠心病患者相比,年轻冠心病患者多为男性(93.9%vs 79.7%；P0.001),吸烟(64.3%vs 39.5%；P0.001)饮酒及心肌梗死的比率较高(27.6%vs 16.3%；P=0.01),高血压比率较低(52.0%vs 65.5%；P=0.01)。年轻冠心病患者BMI(26.66±3.39 kg/m2 vs 25.84±3.04 kg/m2；P=0.013)、血尿酸水平(357.70±85.31μmol/L vs 330.97±86.55 μmol/L;P=0.005).舒张期血压水平(75.92±1068 mmHg vs 73.37士10.37 mm Hg;P=0.023)较高,而收缩期血压水平(123.60±14.56 mm Hg vs 127.31±15.52 mmHg；P=0.026)较低;3D-QCA分析非罪犯斑块发现,年轻冠心病患者所有的两次造影NCCL特征改变都明显大于非年轻冠心病患者。结论：1.年轻冠心病患者非罪犯动脉粥样硬化病变进展明显快于非年轻冠心病患者;心肌梗死为动脉粥样硬化病变进展的另外一个独立危险因素;2.年轻冠心病患者多具有多重危险因素,男性、吸烟、饮酒、及ST段抬高性心肌梗死的比率较高,患高血压比率较低;
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图片说明： 能够帮助我们更加准确的判断病变狭窄的进展。逡逑图１是用３Ｄ邋ＱＣＡ分析冠状动脉粥样硬化病变进展的实例，ａ＾ｂ显示基线时逡逑回旋支病变的最小管腔直径为２．２２ｍｍ，最小管腔面积为４．１５ｍｍ２，斑块体积是逡逑９．８５ｍｍ３；邋Ｃ，ｄ则显示随访造影时与基线相同部位回旋支病变的最小管腔直径为逡逑
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图片说明： ２３年轻冠也病及非年轻冠也病患者基线临床特征逡逑年轻冠也病和非年轻冠必病患者的基线临床特征见表５，所有患者中有９８逡逑位年龄小于４５岁，，与非年轻冠也病患者相比，年轻冠也病患者多为男性（９３．９％邋ＶＳ逡逑７９．７％；邋Ｐ邋＜邋０．００１），吸烟（６４．３0／0邋ＶＳ邋３９．５％邋Ｐ邋＜邋０．００１）饮酒化邋１１、肌梗死的比率较高逡逑口７．６％邋ＶＳ邋１６．３＊？／0；邋Ｐ邋＝邋０．０１），高血压比率较低口２．０0／0邋ＶＳ邋６５．５＜？／0；邋Ｐ邋＝邋０．０１）。年轻冠逡逑±．．±．＝．、
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R541.4


本文编号：2514561