NLRP3在大鼠急性心肌缺血再灌注免疫损伤中的作用

发布时间：2019-09-09 11:53

【摘要】：目的:研究NOD样受体蛋白3(NLRP3)、白细胞介素-6(IL-6)在大鼠心肌缺血再灌注(IR)损伤模型中的表达变化。方法:选择雄性SD大鼠60只,设置IR组30只和假手术组30只。IR组在呼吸机辅助呼吸的前提下,开胸挤出心脏,结扎前降支主干1h,再灌注1h,建立大鼠IR模型。假手术组穿线但不结扎前降支主干,余操作同IR组。造模成功后将心脏组织进行免疫组织化学检测NLRP3的含量,ELISA检测心肌IL-6表达情况。结果:IR组NLRP3较假手术组明显升高,差异有统计学意义(t=55.138,P0.05);IR组IL-6样本浓度较假手术组明显升高,差异有统计学意义(t=68.106,P0.05);对于2个变量进行线性相关分析,差异有统计学意义(R=0.989,P0.05),两者存在正相关性。结论:大鼠心肌IR损伤后NLRP3炎性体表达增加,激活先天免疫系统,促进IL-6的表达增多。
【图文】：

心电图,前降支,电图,主干

乔石，等．ＮＬＲＰ３在大鼠急性心肌缺血再灌注免疫损伤中的作用ＱＩＡＯＳｈｉ，ｅｔａｌ．ＦｕｎｃｔｉｏｎｏｆＮＯＤｌｉｋｅｒｅｃｅｐｔｏｒｐｒｏｔｅｉｎ３ｉｎａｃｕｔｅｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｓｃｈｅｍｉａｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ鼠台；露出气管并进行气管插管，在呼吸机辅助呼吸的前提下（潮气量１５ｍｌ，呼吸频率３０次／ｍｉｎ），开胸挤出心脏，用０号线结扎前降支主干。将ＢＬ－４２０ｓ生物试验系统连接于大鼠的４肢，并记录心电图的表现情况（图１）。见Ⅱ导联ＳＴ段弓背向上抬高后，迅速将心脏放回胸腔内，挤出胸腔内残存气体及血液，简易缝合胸腔、肌肉及皮肤。缺血１ｈ后，再次开胸，用显微外科剪剪开结扎线，观察心电图ＳＴ段是否回落及是否出现再灌注心律失常。假手术组用０号线穿过前降支主干，但并不结扎，余操作同ＩＲ组。图１结扎前降支主干后心电图表现Ｆｉｇｕｒｅ１ＥＣＧａｆｔｅｒｌｉｇａｔｉｏｎ１．３．２ＥＬＩＳＡ染色再灌注１ｈ后，再次开胸分离出所有大鼠的心脏，从主动脉弓水平剪下心脏，用冰０．９％氯化钠溶液冲洗干净后置于干净培养皿中，于冰箱预冷约８ｍｉｎ，取出后弃去心尖部及心底部。剩余心肌组织，按心底到心尖方向分成４等份。将第１、３份标本用于石蜡切片的制作。第２、４份心肌标本置于离心装置内，离心２０ｍｉｎ，取上清液作为检测对象，按照ＢｌｕｅＧｅｎｅ公司生产的试剂盒（ＩＬ－６）的说明书进行检测，最后每孔加入终止液５０μｌ，终止反应，此时蓝色立转黄色，确保酶标板底没有水滴及孔内没有气泡后，立即用酶标仪在４５０ｎｍ波长测量各孔的光

心电图,前降支,电图,主干

乔石，等．ＮＬＲＰ３在大鼠急性心肌缺血再灌注免疫损伤中的作用ＱＩＡＯＳｈｉ，ｅｔａｌ．ＦｕｎｃｔｉｏｎｏｆＮＯＤｌｉｋｅｒｅｃｅｐｔｏｒｐｒｏｔｅｉｎ３ｉｎａｃｕｔｅｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｓｃｈｅｍｉａｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ鼠台；露出气管并进行气管插管，在呼吸机辅助呼吸的前提下（潮气量１５ｍｌ，呼吸频率３０次／ｍｉｎ），开胸挤出心脏，用０号线结扎前降支主干。将ＢＬ－４２０ｓ生物试验系统连接于大鼠的４肢，并记录心电图的表现情况（图１）。见Ⅱ导联ＳＴ段弓背向上抬高后，迅速将心脏放回胸腔内，挤出胸腔内残存气体及血液，简易缝合胸腔、肌肉及皮肤。缺血１ｈ后，再次开胸，用显微外科剪剪开结扎线，观察心电图ＳＴ段是否回落及是否出现再灌注心律失常。假手术组用０号线穿过前降支主干，但并不结扎，余操作同ＩＲ组。图１结扎前降支主干后心电图表现Ｆｉｇｕｒｅ１ＥＣＧａｆｔｅｒｌｉｇａｔｉｏｎ１．３．２ＥＬＩＳＡ染色再灌注１ｈ后，再次开胸分离出所有大鼠的心脏，从主动脉弓水平剪下心脏，用冰０．９％氯化钠溶液冲洗干净后置于干净培养皿中，于冰箱预冷约８ｍｉｎ，取出后弃去心尖部及心底部。剩余心肌组织，按心底到心尖方向分成４等份。将第１、３份标本用于石蜡切片的制作。第２、４份心肌标本置于离心装置内，离心２０ｍｉｎ，取上清液作为检测对象，按照ＢｌｕｅＧｅｎｅ公司生产的试剂盒（ＩＬ－６）的说明书进行检测，最后每孔加入终止液５０μｌ，终止反应，，此时蓝色立转黄色，确保酶标板底没有水滴及孔内没有气泡后，立即用酶标仪在４５０ｎｍ波长测量各孔的光
【作者单位】：内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院心功能科;内蒙古科技大学包头医学院;
【分类号】：R54

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