载脂蛋白C3诱导的内皮细胞ZO-1的表达

发布时间：2020-03-09 04:02

【摘要】：研究载脂蛋白C3对内皮细胞紧密连接中ZO-1表达的作用。采用细胞培养的方法,通过qRT-PCR、免疫荧光、流式细胞术、Western blotting等技术检测APOC3作用状态下内皮细胞内相关分子ZO-1的表达。结果显示,APOC3通过TNF-α引起血管内皮紧密连接中重要蛋白ZO-1表达上升,NF-κB也参与其中,引起内皮功能紊乱。这说明抑制APOC3引起的ZO-1表达改变有可能成为心血管疾病的一个新的治疗思路与靶点。
【图文】：

内皮细胞ＴＮＦ－α表达对于内皮细胞中ＺＯ－１表达的影响。结果表明，当采用ｓｉＲＮＡ敲低细胞内ＴＮＦ－α表达后，ＺＯ－１在ｍＲＮＡ水平和蛋白水平的表达量较直接使用ＡＰＯＣ３作用内皮细胞有所下降。并且在ｑＲＴ－ＰＣＲ和免疫荧光检测中，采用ｓｉＲＮＡ抑制细胞内ＴＮＦ－α的表达后，内皮细胞中ＺＯ－１的表达水平甚至低于未经处理的内皮细胞（图１～３）。该结果表明抑制内皮细胞中ＡＰＯＣ３诱导的ＴＮＦ－α表达可下调内皮细胞中ＺＯ－１的表达。图１ＨＵＶＥＣ中ＺＯ－１表达情况（ｑＲＴ－ＰＣＲ检测ｍＲＮＡ水平）注：空白对照：未经处理的ＨＵＶＥＣ；ＡＰＯＣ３：ＨＵＶＥＣ与ＡＰＯＣ３（１００μｇ／ｍＬ）共孵育２４ｈ；ＡＰＯＣ３＋ｓｉ－ＴＮＦ－α：ＨＵ－ＶＥＣ中转染ＴＮＦ－αｓｉＲＮＡ，之后与ＡＰＯＣ３（１００μｇ／ｍＬ）共孵育２４ｈ。＊＊：与未处理组相比Ｐ＜０．０１图２ＨＵＶＥＣ中ＺＯ－１表达情况（流式细胞术检测蛋白水平）注：空白对照：未经处理的ＨＵＶＥＣ；ＡＰＯＣ３：ＨＵＶＥＣ与ＡＰＯＣ３（１００μｇ／ｍＬ）共孵育２４ｈ；ＡＰＯＣ３＋ｓｉ－ＴＮＦ－α：ＨＵＶＥＣ中转染ＴＮＦ－αｓｉＲＮＡ，，之后与ＡＰＯＣ３（１００μｇ／ｍＬ）共孵育２４ｈ。＊＊：与未处理组相比Ｐ＜０．０１；＊：与未处理组相比Ｐ＜０．０５；＃＃：与ＡＰＯＣ３共孵育组相比Ｐ＜０．０５·４８０·《现代免疫学》２０１７年第３７卷第６期

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