牛磺熊去氧胆酸通过调节内质网应激对支架内再狭窄的作用

发布时间：2020-03-29 09:14

【摘要】：目的:探究牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)通过调节内质网应激(ER stress),抑制血管平滑肌细胞(VSMCs)去分化,减少新生内膜增生率,最终抑制支架内再狭窄的发生,并探究这一作用是通过ER stress下游的IRE1/XBP1通路得以实现的。方法与结果:细胞实验:通过细胞划痕实验、MTT以及western blotting来评估TUDCA对ER stress以及VSMCs表型转化的影响。实验结果表明不同浓度的TUDCA(10-1000μmol/L)能显著抑制由PDGF-BB诱导的VSMCs的增殖和迁移,并降低ER stress IRE1/XBP1 通路中相关蛋白标记物(IRE1,XBP1,KLF4 和 GRP78 等)的蛋白表达水平,并且这一效应具有浓度依赖性。动物实验:给18只新西兰雄性大白兔喂养致动脉粥样硬化饮食,诱导动脉粥样硬化形成。随机分为3组:BMS组(植入裸支架)、BMS+TUDCA组(植入裸支架+口服TUDCA)和Firebird组(植入火鸟支架),在上述新西兰大白兔的左颈总动脉植入相应支架。在第28天对动物实施安乐死,收获带支架的左颈总动脉用于扫描电子显微镜(SEM),HE染色和免疫组化。结果表明,3组动物的左颈总动脉支架表面均被新生内膜覆盖,但与 Firebird 组(1.90±0.1mm2)和 BMS 组(2.3±0.1mm2)相比,BMS+TUDCA组(1.6±0.2mm2)的新生内膜面积显著减少,同样,BMS+TUDCA组的新生内膜增生率最低,其次是Firebird组,而BMS组的新生内膜增生率最高(BMS+TUDCA 28±4%,Firebird 35±7%,BMS 40±1%;P0.001)。此外,与 BMS 组相比,口服TUDCA的BMS+TUDCA组,其ER stress中IRE1/XBP1通路的相关蛋白表达水平也被明显抑制。结论:TUDCA能抑制VSMCs的去分化,减轻新生内膜增生率,从而降低支架内再狭窄可能,并且这种机制是通过下调IRE1/XBP1信号通路来实现的。
【图文】：

用不同浓度的ＴＵＤＣＡ邋（１０，１００和１０００ｍｍｏｌ／Ｌ）预处理ＶＳＭＣｓ，然后用逡逑ＰＤＧＦ－ＢＢ邋（２０ｎｇ／ｍＬ）干预２４小时。正如通过划痕实验和ＭＴＴ测定所ｉ乎估的，逡逑ＴＵＤＣＡ以浓度依赖性的方式抑制ＰＤＧＦ－ＢＢ诱导的ＶＳＭＣｓ的增殖和迁移（图１Ａ逡逑和邋ＩＢ，邋Ｐ＜０．０５）。逡逑Ａ：１邋—一逡逑Ｍ逦咖躲邋ｉｏ１＾逦ｆ邋ｆ逡逑／邋／邋／邋／逡逑－１逦３逦／邋／邋／逡逑％逦＾逦？．逦ＫＫ５Ｐ－８８逦、逦＾逡逑Ｉ逦ＴＵＤＣＡ邋１０邋ｍｍｏＳ／Ｌ逡逑Ｑ邋ｌ邋０ＪＳ１逦ＴＵＤＣＡ邋１００邋ｆｎｍｏｌＡ逡逑Ｗ逦Ｉ逦一一＾逦ＴＵＤＣＡ逦１０００ｍｍｏｌ／ｉ逡逑１２Ｓ逦ｓ＊？逦；＞？逡逑图１邋ＴＵＤＣＡ抑制ＰＤＧＦ－ＢＢ诱导的ＶＳＭＣｓ去分化。对照组：ＶＳＭＣｓ没有任何逡逑干预；ＰＤＧＦ－ＢＢ：邋ＶＳＭＣｓ邋用邋ＰＤＧＦ－ＢＢ邋（２０ｎｇ／ｍＬ）干预；ＴＵＤＣＡ：邋ＶＳＭＣｓ邋用不逡逑８逡逑

组（植入火鸟支架），在其左侧颈总动脉中分别植入ＢＭＳ和火鸟支架，４周后取逡逑出带有支架的动脉用于ＳＥＭ，邋ＨＥ和免疫组织化学染色。ＳＥＭ显示所有支架表面逡逑均被新生内膜完全覆盖，并且可从血管的横截面看到支架（图４Ａ）。增加扫描电逡逑子显微镜的放大倍数，分别摄取了来自支架近端和远端区域的代表性图像，分别逡逑显示为内皮细胞，平滑肌细胞，，表面血栓和炎性细胞。（图４Ｂ）。逡逑、…．ｍ邋＾邋二逡逑ＢＭＳ逦ＢＭＳ＋ＴＵＤＣＡ逦Ｆｉｒｓｂｉｒｄ逡逑ｂ邋ｉＮ逦

本文编号：2605772