新疆哈、汉族人群原发性高血压与缝隙连接基因多态性的相关性研究

发布时间：2020-04-28 19:04

【摘要】：目的:检测新疆哈、汉族人群缝隙连接蛋白基因上的27个SNP位点多态性,并探讨其与原发性高血压的相关性。方法:①应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性对新疆哈萨克族130名EH患者及150名正常对照组进行基因分型。②应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术检测对新疆地区259例哈萨克族EH患者和261例对照组,以及新疆地区260例汉族EH患者和265例对照组进行Cx基因位点多态性检测。③采用SPSS17.0统计软件包对数据资料进行统计学处理和分析,采用Hardy-Weinberg平衡检验判断研究对象是否有人群代表性。结果:①除4个位点没有多态性外,其他SNP位点均符合Hardy-Weinberg平衡(P均㧐0.05)。②在哈萨克族人群中,-44GA位点EH组基因型AA、AG、GG和等位基因A、G频率分别为5.38%、40%、54.62%和25.38%、74.62%,EH组与对照组差异无统计学意义(P0.05);+71AG位点EH组基因型AA、AG、GG和等位基因A、G频率分别为54.62%、40%、5.38%和74.62%、25.38%,EH与对照组差异无统计学意义(P0.05)。③rs1630310位点在哈族人群中EH组的AA、AG和GG基因型频率分别为24.8%、47.2%和28%,等位基因A、G频率分别为48.4%,51.6%,与对照组相比差异均具有显著统计学意义(P=0.016,P=0.00);在汉族人群中EH组的AA、AG和GG基因型频率分别为24%、52.8%和23.2%,等位基因A、G频率分别为50.4%,49.6%,与对照组相比差异均无显著统计学意义(P=0.42,P=0.25)。rs1925223位点在哈族人群中EH组的CC、CG和GG基因型频率分别为5.3%、33.6%和61.2%,等位基因C、G频率分别为22%,78%,与对照组相比差异无显著统计学意义(P=0.37,P=0.16);在汉族人群中EH组的CC、CG和GG基因型频率分别为6.4%、35.6%和58%(P=0.048),与对照组相比差异具有显著统计学意义,等位基因C、G频率分别为48.4%,51.6%(P=0.08),与对照组相比差异无显著统计学意义。其余SNP位点在EH组和对照组的分布差异无统计学意义(P㧐0.05)。结论:Cx37基因rs1630310位点多态性可能与新疆哈萨克族原发性高血压相关,Cx43基因rs1925223位点多态性可能与新疆汉族原发性高血压相关,携带rs1630310 A和rs1925223 G可能为EH的保护因素。
【图文】：

示意图,后片,段长度,基因

酶切反应：限制性酶切反应体系均为 31 μl，，rs35594137 位点包水 18 μl，buffer R 2 μl，HaeⅢ限制酶 1 μl；rs11552588 位点包水 18 μl，EcoR buffer R 2 μl，EcoR 1 限制酶 1 μl。37 度恒温水.5 %琼脂糖凝胶在 80 V 电压、0.5×TBE 缓冲液中进行水平电泳取出，放置于自动凝胶成像仪中成像，观察分析基因型。判读：Cx40 基因 rs35594137 位点酶切后片段长度示意图：由于识别 rs35594137 等位基因 G，而不能识别等位基因 A。因此切，电泳片段为 150 bp；GG 纯合子，由于存在酶切位点，电泳结p 两个片段；而 AG 杂合子同时具有两种纯合基因型的特征，电泳上可出现 150 bp、126 bp 及 24 bp 三个片段，见图 1。位点酶切后片段长度示意图：由于限制性内切酶 EcoR 1 可识别，而不能识别等位基因 A。因此，AA 纯合子显示不被酶切，电泳子，由于存在酶切位点，电泳结果生成 121 bp 及 24 bp 两个具有两种纯合基因型的特征，故在 2.5 %琼脂糖凝胶电泳上可24 bp 三个片段，见图 1、2。

示意图,后片,段长度,基因

图 2 EcoR 1 酶切 Cx40 基因 rs11552588 PCR 产物后片段长度示意图理所有计量数据以 x ±s表示，计数资料以频数表示。应用计分析，检验其是否符合Hardy-Weinberg平衡，并计算各组各位频率。比较组间频率通过χ2检验来进行，P<0.05 为差异有统计DI-TOF MS 质谱分析检测 SNPTOF MS 技术检测 SNP 的实验流程引物扩增酶处理基延伸除盐纯化点样检测报告
【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R544.11

【参考文献】