TET2抑制低剪切应力诱导的动脉粥样硬化及其机制研究

发布时间：2020-05-08 17:42

【摘要】：动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)的发生发展表现为动脉对内膜损伤导致的纤维增生性反应,低剪切应力诱导内皮间质转化(End MT)且为As进程中重要的生物学过程,但其调控机制尚不清楚。研究表明DNA羟甲基化酶TET2为剪切应力敏感基因,TET2缺失或突变促进As进程。目的:本文将探讨TET2对低剪切应力下End MT的影响。方法:1、采用颈总动脉局部结扎apo E-/-小鼠模型,动物实验分组如下:(1)颈总动脉局部结扎;(2)颈总动脉局部结扎+TET2过表达慢病毒载体(LV-TET2)感染组;2、采用人重组TGFβ1诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEs)发生End MT,使用TET2过表达慢病毒载体(LV-TET2)、TET2干扰慢病毒载体(TET2 sh RNA)转染技术,从细胞分子水平检测TET2对End MT的影响,分组如下:(1)空白对照组,(2)TGFβ1处理组,50ng/ml,(3)TET2 sh RNA转染组,(3)LV-TET2转染+TGFβ1处理组。结果:动物实验,HE、油红O染色结果显示,对照组apo E-/-小鼠As病变严重,TET2过表达明显抑制局部狭窄apo E-/-小鼠As病变;免疫荧光显示TET2过表达组血管内皮细胞VE-Cadherin,CD31表达高于对照组,间质细胞抗原(如α SMA)以及Wnt/β catenin信号通路下游靶基因MYC、ID1、AXIN2低于对照组。细胞学实验结果表明,与对照组相比,经TGFβ1处理后的HUVEs形态及细胞骨架发生改变,VE-Cadherin蛋白表达减少,而α-SMA、FAP等间质标记蛋白表达上调;与对照组相比,TET2干扰组中VE-Cadherin蛋白质表达减少,而α-SMA蛋白质表达量增多,FAP蛋白质表达量无明显改变;而与TGFβ1处理组相比,LV-TET2+TGFβ1组细胞形态保持鹅卵石形,细胞骨架无明显变化,VE-Cadherin蛋白表达上调、α-SMA、FAP等蛋白表达下调。结论:TET2通过下调Wnt/β-catenin信号途径抑制低剪切应力诱导的内皮间质转化,抑制As。
【图文】：

A.左颈总动脉（LCA）部分结扎的示意图.LCA 的三个分支颈外动脉（ECA）动脉（ICA）和枕动脉（OA）结扎 、甲状腺上动脉（STA）开放;右颈总动脉（不做结扎术; B.手术组高脂喂养 4 周后体视显微镜观察颈总动脉 As 病变 （C.HE 染色观察局部结扎对 apoE-/-小鼠颈动脉As斑块的影响(n=10，Scale bar=D.病变面积统计分析（n=10,****P<0.0001 vs RCA group）

18图 3.1 A.左颈总动脉（LCA）部分结扎的示意图.LCA 的三个分支颈外动脉（ECA）、颈内动脉（ICA）和枕动脉（OA）结扎 、甲状腺上动脉（STA）开放;右颈总动脉（RCA）不做结扎术; B.手术组高脂喂养 4 周后体视显微镜观察颈总动脉 As 病变 （×1.0）；C.HE 染色观察局部结扎对 apoE-/-小鼠颈动脉As斑块的影响(n=10，Scale bar=50μm)；D.病变面积统计分析（n=10,****P<0.0001 vs RCA group）
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R543.5

【参考文献】

相关期刊论文 前3条

1 张晶晶;游咏;李熠;桂庆军;冯聚玲;尹凯;;内皮-间质转化与心血管疾病的研究进展[J];生物化学与生物物理进展;2015年07期

2 危当恒;王贵学;唐朝君;刘录山;任重;;局部狭窄血管远心端流场数值模拟和PIV测定[J];南华大学学报(医学版);2010年01期

3 彭红艳;常青;;血管内皮细胞骨架及其与心血管疾病的关系[J];中国循环杂志;2007年05期

，

本文编号：2654976