氢氯噻嗪对自发性高血压大鼠肾脏CLC-K2活性的影响

发布时间：2020-06-20 04:09

【摘要】：目的:肾脏特异性电压门控氯离子通道(CLC-K)主要分布于肾脏,对调节Cl~-的排泄有重要作用,主要包括CLC-K1和CLC-K2。CLC-K2主要分布在髓袢升支粗段、远曲小管、集合管和连接小管的闰细胞,可影响血压的调节。CLC-K2活性增高的人群,原发性高血压的发生率增加;将CLC-K2基因敲除或药物抑制CLC-K2活性后,血压降低。氢氯噻嗪是临床广泛应用的降压药物,但是其作用机制尚未完全明确,且不同高血压患者对氢氯噻嗪降压治疗的反应性有较大差异。研究氢氯噻嗪的作用机制对正确合理选择降压药种类,提高血压达标率有重要作用。本研究旨在探索氢氯噻嗪对SHR大鼠肾脏CLC-K2基因表达水平的影响,从而为氢氯噻嗪的降压机制提供理论依据。方法:清洁级健康雄性SHR大鼠30只,8周龄,体重230-258g,适应性饲养2周后,按2:1的比例将SHR大鼠随机分为2组,20只为实验组,10只为正常对照组。实验组大鼠于每天19点给予灌服氢氯噻嗪10mg/kg/天,对照组大鼠于每天同样时间给予等剂量蒸馏水,喂养10周。分别于灌药前1天和灌药结束第2天收集每只大鼠24小时尿量,并称量各大鼠的体重,且用无创鼠尾血压计测量2组大鼠的血压。腹腔注射10%水合氯醛麻醉后摘取各大鼠的肾脏,并从腹主动脉采血后分离血清,分别用Real Time PCR和ELISA的方法检测肾脏中CLC-K2 mRNA和血清AngII的水平,若实验组和对照组大鼠CLC-K2基因表达水平有差异则根据血压降低幅度的大小将实验组大鼠按照四分位法分为A、B、C、D组,比较其CLC-K2基因的表达水平是否与降压效果有关。采用t检验和方差分析比较各组之间是否存在,当P0.05时,差异有统计学意义。结果:1.独立样本t检验显示灌药前实验组和对照组大鼠的体重、尿量、收缩压差异均无统计学意义(P0.05)。2.配对t检验显示灌药前后实验组和对照组大鼠的尿量差异无统计学意义(P0.05);灌药后实验组和对照组大鼠的体重与灌药前相比均增加,差异有统计学意义(P0.05);灌药前后对照组大鼠的收缩压差异无统计学意义(P0.05);灌药后实验组大鼠的收缩压较灌药前降低,差异有统计学意义(P0.05)。独立样本t检验显示灌药后实验组大鼠的体重与对照组相比,差异无统计学意义(P0.05)。3.独立样本t检验显示灌药后实验组和对照组大鼠血清AngII浓度差异无统计学意义(P0.05)。4.独立样本t检验显示灌药后实验组大鼠肾脏CLC-K2基因水平高于对照组(1.77倍),差异有统计学意义(P0.05)。5.方差分析显示灌药组A、B、C、D四组大鼠血压下降程度不同,各组间差异有统计学意义(P0.01)。四组大鼠间CLC-K2 mRNA表达水平的差异无统计学意义(P0.05)。结论:1.长期灌服氢氯噻嗪可以降低SHR大鼠的收缩压。2.氢氯噻嗪长期的降压机制与减少循环血量无关。3.氢氯噻嗪的长期作用对血中AngII的水平无影响。4.氢氯噻嗪可提高肾脏CLC-K2的表达水平,但并未直接作用于CLC-K2。5.氢氯噻嗪的降压效果有个体差异,此差异与CLC-K2表达水平无关。
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R544.1
【图文】：

扩增曲线

CLC-K2扩增曲线

扩增曲线

β-actin扩增曲线

【参考文献】