巨噬细胞移动抑制因子在兔系统性硬化症相关肺动脉高压形成中的作用

发布时间：2020-08-09 02:08

【摘要】：目的:研究博来霉素(bleomycin,BLM)联合野百合碱(monocrotaline,MCT)模拟的系统性硬化症相关肺动脉高压(systemic sclerosis associated pulmonary arterial hypertension,SSc-PAH)兔模型中巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)的作用。方法:研究1:将实验雄性家兔50只按随机数字表分为5组,各组10只,具体如下,A组:溶剂对照组,B组:大剂量MCT组,C组:小剂量MCT组,D组:小剂量MCT联合BLM组,E组:单药BLM组。B组与C组分别一次性腹腔注射1%MCT溶液60 mg/kg、40 mg/kg,D组一次性腹腔注射1%MCT溶液40mg/kg,每天腹腔注射BLM溶液100 ul/只,E组:每天腹腔注射BLM溶液100ul/只,溶剂对照组予以等体积量溶剂(采用无水乙醇与生理盐水2:8比例混合)腹腔注射。3周后麻醉解剖取材,测量肺动脉压力,右心室肥大指数(Right ventricular hypertrophy index,RVHI),皮肤、肺动脉干及肺组织石蜡切片制作及HE染色观察病理改变。研究2:30只健康雄性家兔,随机分为3组:分别为溶剂对照组、模型组、MIF靶向抑制组,每组10只。模型组按上述实验1方法造模,MIF靶向抑制组在造模的同时予以MIF靶向抑制剂ISO-1 0.66 mg/(kg·d)腹腔注射,溶剂对照组每日腹腔注射等体积溶剂,观察动物的一般情况,21天后,检测所有动物的右心室肥大指数以及肺动脉压力,并对皮肤、肺动脉干及肺组组进行HE染色,Western blotting及免疫组化检测肺组织中MIF的表达。结果:研究1:1、一般情况:BCD三组注射药物10天后开始出现毛发暗淡缺少光泽,呼吸频率变快,活动的范围及次数减少,食欲有所下降。从第16天起,DE两组相继出现腹部注射区域皮肤部分增厚、变硬、弹性差,未见兔毛。A组未出现上述改变,毛发、活动量、饮水进食量、呼吸等情况同前无明显变化,体重随时间增加。小剂量BLM联合MCT组共死亡2只,造模成功率为80%;2、与A、E两组对比,B、C、D组右心室肥大指数及平均肺动脉压力明显增高,差异有统计学意义;3、病理:DE两组皮肤真皮层增厚,毛囊及附属腺体减少、萎缩甚至消失,胶原纤维明显增多、增粗、排列紧密,脂肪组织减少,被胶原纤维所包绕、代替,ABC组均未出现上述变化。与AE两组相比,B、C、D组肺小动脉明显增厚、管腔狭窄,肌型肺小动脉中膜明显增厚,肺组织可见炎症细胞的浸润;AE两组肺组织及肺动脉干结构正常,无上述改变。研究2:1、与对照组相比,模型组及精神状态差、活动量减少,饮水进食减少,毛发无光泽,呼吸急促,注射部位皮肤局部增厚、弹性变差。MIF靶向抑制组皮毛光泽度一般,活动有所减少,注射部位皮肤较对照组变硬,但较模型组柔软,弹性一般。2、与对照组相比,模型组及MIF靶向抑制组右心室肥大指数及平均肺动脉压力明显增高,具有统计学差异。模型组皮肤真皮层增厚,皮肤附属器减少,肺组织及间质可见炎性细胞的浸润,肺动脉干及肺小动脉管壁增厚,管腔狭窄,MIF靶向抑制组较正常对照组增厚,较模型组有所减轻。3、Western blotting显示:模型组中肺组织MIF蛋白高表达,与对照组及MIF靶向抑制组比较差异具有统计学意义,MIF靶向抑制组MIF蛋白表达下调,相比对照组及模型组具有统计学意义。4、免疫组化显示:MIF在模型组肺组织高表达,且位于肺小动脉内膜,MIF靶向抑制组结果显示MIF表达下调。结论:1、博来霉素联合野百合碱(40 mg/kg)可成功模拟兔SSc-PAH模型,较大剂量MCT(60 mg/kg),使用40 mg/kg的MCT降低了其死亡率,提高了成功率。2、MIF在兔SSc-PAH模型肺组织中高表达,靶向抑制MIF后,MIF表达下调,提示MIF在兔SSc-PAH模型发病机制中起重要作用。
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R593.2;R544.1
【图文】：

0 5 10 15 20 251.21.4时 间 （天）体图 4 各组右心室肥大指数比较剂量 MCT、联合组相比 P<0.05,*与对照组相比 P<0.01,#表示与大剂剂量 MCT、联合组相比 P<0.01结构变化皮肤 HE 染色病理示：DE 组皮肤真皮层增厚伴有真皮下层附属腺体减少、萎缩甚至消失，胶原纤维明显增多、增织减少，被胶原纤维所包绕、代替，ABC 组均未出现上均为 10 ）。

0 5 10 15 20 251.21.4时 间 （天）体图 4 各组右心室肥大指数比较剂量 MCT、联合组相比 P<0.05,*与对照组相比 P<0.01,#表示与大剂剂量 MCT、联合组相比 P<0.01结构变化皮肤 HE 染色病理示：DE 组皮肤真皮层增厚伴有真皮下层附属腺体减少、萎缩甚至消失，胶原纤维明显增多、增织减少，被胶原纤维所包绕、代替，ABC 组均未出现上均为 10 ）。

图 7 C 组实验兔皮肤 图 8 D 组实验兔皮肤 图 9 E 组实验兔皮肤2.2.6 肺动脉干结构变化各组肺动脉干病理如下：BCD 组肺动脉干管腔明显增厚、狭窄，肌型肺小动脉中膜明显增厚，管壁及血管周围有大量炎性细胞浸润。AE 组实验兔肺动脉干无上述变化，结构正常。如图 10-14（均为 10 ）。图 10 A 组实验兔肺动脉 图 11 B 组实验兔肺动脉

【参考文献】

相关期刊论文 前3条

1 罗妍;王迁;;系统性硬化症动物模型[J];中华临床免疫和变态反应杂志;2014年03期

2 马凯;邢泉生;邢介龙;泮思林;;不同剂量野百合碱诱导大鼠肺动脉高压模型的实验研究(英文)[J];现代生物医学进展;2013年21期

3 张芳;谢悦;张昊;王伟;;结缔组织病相关肺动脉高压模型的建立[J];中华风湿病学杂志;2012年03期

相关博士学位论文 前1条

1 王为;结缔组织病相关肺动脉高压的血清标记物研究[D];北京协和医学院;2010年

本文编号：2786435