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鞣花酸对缺氧肺动脉高压影响的研究

发布时间:2020-10-09 02:54
   目的:研究鞣花酸对缺氧肺动脉高压的影响及其可能的机制。方法:1.动物实验及分组40只SD雄性大鼠(体重180-220g),随机分为四组,每组10只。分别为:A常氧组:于室温常氧环境下饲养4周。B常氧+鞣花酸组:于室温常氧环境下,每日给予鞣花酸15mg/kg灌胃,饲养4周。C低氧组:室温下将大鼠每日置于10%氧气浓度的低氧箱中8h,连续四周。D低氧+鞣花酸组:室温下将大鼠低氧暴露之前,给予鞣花酸15mg/kg灌胃,然后于10%氧气浓度的低氧箱中8h,连续4周。2.测定右心室收缩压将大鼠按上述分组处理4周后,经右颈静脉插入导管至右心室另一端连接压力传感器,经生理信号记录仪分析系统测定大鼠右心室收缩压(RVSP)。3.右心室肥厚指数测定取实验大鼠出心脏,去除左右心房后分离右心室(RV)及左心室+室间隔(S+LV)并准确称量重量。以公式(RVHI)=(RV)/(LV+S)计算右心室肥厚指数。4.肺组织中的超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量测定:称取各组大鼠相同部位(右肺下叶)肺组织100mg,磨碎制作组织提取液按照试剂盒说明步骤测定肺组织内的SOD和MDA含量。5.免疫组化染色肺组织内α-SMA检测取各实验组大鼠同一部位肺组织(左肺下叶)制作肺组织生理切片后进行α-SMA抗体免疫染色。6.大鼠肺动脉平滑肌细胞体外培养及实验分组取健康大鼠肺动脉血管进行细胞传代培养后取3-5代生长良好的肺动脉平滑肌细胞,按以下方法分组:A:常氧+加等量PBS液组;B:低氧+等量PBS液组;C:低氧+5μmol/L鞣花酸组;D:低氧+10μmol/L鞣花酸组;E:低氧+15μmol/L鞣花酸组;F:低氧+20μmol/L鞣花酸组。将分组处理好的细胞置于37℃恒温培养箱内培养48h。7.台盼蓝实验胰蛋白酶消化培养的各组细胞,制作细胞悬液,将细胞浓度调整至1×105/ml,按细胞悬液/%0.4台盼蓝溶液=9:1比例滴加台盼蓝溶液,混匀。显微镜下观察计数各组中存活细胞和死亡细胞。8.Western-blot方法检测测定各组细胞中p38MAPK和ERK1/2蛋白的表达。结果:1.与常氧组大鼠及常氧+鞣花酸组大鼠相比,低氧组大鼠右心肥厚指数[RV/(LV+S)]明显增高(p0.05),单纯低氧组大鼠右心肥厚指数高于低氧+鞣花酸组大鼠(p0.05),常氧组大鼠与常氧+鞣花酸组大鼠右心肥厚指数差异无统计学意义(p0.05)。2.与常氧组大鼠及常氧+鞣花酸组大鼠相比,低氧组大鼠右心肥厚指数[RV/(LV+S)]明显增高(p0.05),单纯低氧组大鼠右心肥厚指数高于低氧+鞣花酸组大鼠(p0.05),常氧组大鼠与常氧+鞣花酸组大鼠右心肥厚指数差异无统计学意义(p0.05)。3.过对α-SMA染色观察肺血管的变化发现,常氧组大鼠与常氧+鞣花酸组大鼠相比较,肺血管结构物明显变化。低氧组大鼠肺血管与常氧组相比,肺血管中膜增厚明显。低氧+鞣花酸组大鼠与单纯低氧组大鼠相比较,肺血管中膜厚度明显下降。4.与常氧组大鼠相比,低氧组大鼠SOD含量明显降低(p0.05),单纯低氧组与低氧+鞣花酸组大鼠相比较,单纯低氧组大鼠肺组织SOD含量较低(p0.05),常氧组大鼠与常氧+鞣花酸组大鼠肺组织SOD含量差异无统计学意义(p0.05)。5.与常氧组大鼠相比,低氧组大鼠MDA含量明显增高(p0.05),单纯低氧组与低氧+鞣花酸组大鼠相比较,低氧+鞣花酸组大鼠肺组织MDA含量明显下降(p0.05),常氧组大鼠与常氧+鞣花酸组大鼠肺组织MDA含量差异无统计学意义(p0.05)。6.与常氧组肺动脉平滑肌细胞相比,低氧组肺动脉平滑肌细胞ROS明显增高(p0.05),低氧+鞣花酸组肺动脉平滑肌细胞ROS水平与单纯低氧组肺动脉平滑肌细胞相比明显下降(p0.05)。7.与常氧组相比较,低氧组大鼠肺动脉平滑肌细胞的p38MAPK和ERK1/2蛋白的表达水平明显升高(p0.05),与单纯低氧组相比,低氧+鞣花酸组大鼠肺动脉平滑肌细胞p38MAPK和ERK1/2蛋白的表达水平明显明显下降(p0.05)。
【学位单位】:广西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2019
【中图分类】:R544.1
【部分图文】:

鞣花酸,大鼠,常氧,低氧处理


3结果.鞣花酸对缺氧肺动脉高压大鼠右心室收缩压及肥厚指数的影.1 根据各组实验数据显示,低氧处理4周后,低氧处理组大压(RVSP)明显比常氧组大鼠及常氧+鞣花酸组高(p<0.05)PBS液组大鼠 RVSP明显比低氧+鞣花酸组大鼠高(p<0.05与常氧+鞣花酸组大鼠相比,RVSP差异没有统计学意义(p>-1。

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图1-2.鞣花酸对缺氧肺动脉高压大鼠右心肥厚指数影响Figure1-2.Effect of ellagic acid on right heart hypertwith hypoxic pulmonary hypertension注:*p<0.05 与常氧组相比较,#p<0.05 与缺氧组相比较.鞣花酸对缺氧肺动脉高压大鼠血管平滑肌细-SMA)表达影响。氧环境下肺动脉平滑肌细胞的过度增殖是缺氧性肺要病理基础。肺动脉平滑肌过度增殖,导致肺血管的重构。α-SMA 蛋白是平滑肌特异性蛋白,可通过血管的变化。观察各组大鼠肺组织染色切片发现,常酸组大鼠相比较,肺血管结构物明显变化。单纯低组相比,肺血管中膜增厚明显。低氧+鞣花酸组大鼠较,肺血管中膜厚度明显下降。见图2-1。

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图1-2.鞣花酸对缺氧肺动脉高压大鼠右心肥厚指数影响2.Effect of ellagic acid on right heart hypertoxic pulmonary hypertension.05 与常氧组相比较,#p<0.05 与缺氧组相比较对缺氧肺动脉高压大鼠血管平滑肌细影响。动脉平滑肌细胞的过度增殖是缺氧性肺。肺动脉平滑肌过度增殖,导致肺血管-SMA 蛋白是平滑肌特异性蛋白,可通过。观察各组大鼠肺组织染色切片发现,常比较,肺血管结构物明显变化。单纯低血管中膜增厚明显。低氧+鞣花酸组大鼠中膜厚度明显下降。见图2-1。

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