在体调控巨噬细胞促进组织工程血管快速内皮化的研究

发布时间：2021-01-07 03:45

　　心血管疾病（CVDs）是目前人类死亡的主要原因。对于这些患者的冠状动脉搭桥手术,小口径组织工程化血管（TEBVs）,临床需求量很大,尤其是直径小于6mm的血管。但是小口径TEBVs由于缺乏功能性内皮,移植入体内后极易发生血栓、慢性炎症和内膜增生,导致移植手术失败。内皮作为血管功能最重要的组成部分,在让血管保持长期通畅的方面起着重要的作用。因此,TEBVs的快速内皮化是抑制移植后血栓形成、慢性炎症和内膜增生的重要策略。TEBV植入后,单核细胞被招募到移植部位并转化为巨噬细胞,巨噬细胞参与血管生成。利用巨噬细胞的生理学功能,在TEBV中构建一种细胞生物反应器,通过石墨烯量子点（GQD）介导的microRNA（miR）递送、转染来改造巨噬细胞。通过改造后的巨噬细胞可以在血管移植区域持续分泌血管内皮生长因子（VEGF）,促进内皮细胞的迁移（ECs）来实现TEBVs的快速内皮化。本论文主要研究内容和结论如下:（1）GQDs的生物相容性测试。透射电镜（TEM）对GQDs进行了形貌检测,结果显示GQDs直径大小约为50-100纳米。红外光谱的结果显示GQDs-NH₂存在氨基官能... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

用CCK8检测不同浓度GQDs-NH2对巨噬细胞和ECs24h活力影响

图 4 巨噬细胞、内皮细胞和平滑肌细胞与 GQDs 共培养 0、6、24 h 后的 TEM 分析。图 4 TEM analysis of GQDs taken up by macrophages; SMCs and ECs after coculture at 0 h, 6h and 243.2.2 GQDs-miR150 的合成制备 GQDs-miR150 的过程如图 5 所示。我们用双功能交联剂 sulfo-LC-SPDP 先QDs-NH2反应，让 GQDs 上形成活化的基团 GQDs-S-S-，再将巯基化的 miR150 与应，miR150 上的-SH 会与 GQDs-S-S-反应，从而形成 GQDs-miR150。3.2.3 GQDs-miR150 体系的红外光谱检测GQDs-miR150 检测的红外光谱结果如图 6 所示。GQDs-miR150 的红外波谱新增加多在比GQDs-NH2的红外波普中不存在的峰，miR150的红外波谱上的峰在GQDs-miR1红外波谱图上能找到对应的峰。图示结果表明 miR150 被成功修饰到 GQDs 上。3.2.4 GQDs-miR150 DTT 体外切断实验DTT 切断实验的荧光光谱结果如图 7 所示，GQDs-miR150-Cy5 的荧光强度达到

陆军军医大学硕士学位论文 400 左右，在被 DTT 作用后，荧光强度与 DTT 作用之前相比急剧下降。作为 GQDs 溶液荧光强度仅为 100 左右。


本文编号：2961843