转录因子EPAS1和EGR-1在心肌细胞凋亡中的功能研究

发布时间：2021-01-08 03:54

　　心肌缺血是心血管疾病高死亡率的主要原因（每年死亡人数达到740万人）,与心肌细胞的大量死亡息息相关。其发病机理主要有两种:一种是由动脉粥样硬化、血管炎、血栓等引起的冠状动脉循环受阻;另一种是由血管舒缩功能失调导致的血液运输动力不足。当心脏不能及时供应足够的血液时,缺氧、营养匮乏、铜离子流失及有毒代谢产物积累等细胞微坏境的变化,将导致心肌细胞大量的死亡,造成心脏功能的不可逆损伤。因此,抑制心肌细胞死亡对于心肌缺血的治疗是至关重要的。鞘氨醇磷酸胆碱（SPC）是一种内源性产生的,具有生物活性的鞘磷脂代谢物。我们实验室前期的研究表明SPC能够抑制缺血引起的心肌细胞凋亡。由于SPC发挥生物功能的形式多样（既可以直接影响细胞膜上的G蛋白偶联受体,又可以影响细胞质中钙离子浓度）,为了进一步探究SPC抑制心肌细胞凋亡的机制,我们运用芯片分析了可能参与该保护过程的基因。芯片结果显示Epas1和Egr1发生了明显变化,因此推测它们可能是SPC调节凋亡的关键因子。EPAS1,也叫HIF2α,是HIF家族成员,能够迅速地对氧浓度的改变做出反应。在HIF家族中HIF1被研究地更多并且被认为具有促凋亡作用。而EP... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２－１：?ｓｔａｔ３的结构和磷酸化位点［１０６］??ＳＴＡＴ３的转录活性主要是取决于由Ｔｙｒ７０５形成的磷酸化二聚体

??路。通过免疫焚光，我们发现ＳＰＣ促进了?ＳＴＡＴ３的入核（图３－４?Ａ），ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ??表明ＳＰＣ能够上调ＳＴＡＴ３的磷酸化水平（图３－４?Ｂ）。并且加入ＳＴＡＴ３的抑制剂??ｓｔａｔｔｉｃ处理后，ＳＰＣ的保护作用被破坏（图３－４?Ｃ）。说明了?ＳＴＡＴ３参与了?ＳＰＣ抑??制缺血性心肌细胞凋亡的通路。用ｓｔａｔｔｉｃ抑制剂处理Ｈ９ｃ２后，ＱＰＣＲ检测??ｍｉＲ－１５５－５ｐ的变化，发现ＳＰＣ引起的ｍｉＲ－１５５－５ｐ下调作用被抑制，说明ＳＴＡＴ３??确实是ｍｉＲ－１５５－５ｐ的上游因子（图３－４Ｄ）。??讨论??ＳＰＣ是生物体内天然存在的具有生物活性的脂类代谢产物，能够影响细胞在??增殖、分化、凋亡和自噬。前期报道指出ＳＰＣ通过影响脂筏、促进细胞自噬、??调控ｍＴＯＲ和ＪＮＫ的活性等方式抑制心肌细胞的凋亡。本研究中，我们发现了??一个新的受ＳＰＣ调控的因子，ＥＰＡＳ１。ＥＰＡＳ１是一个多功能的转录因子，在缺??血性心肌细胞凋亡方面的研究还没有报道。我们的研究揭示了?ＥＰＡＳ１在缺血性??心肌细胞凋亡中的功能，发现ＳＰＣ是通过对ＥＰＡＳ１的调控起到抑制凋亡的作用??的。本研宄更为全面的阐释了?ＳＰＣ发挥作用的分子机制

ｆ?ｊ?＾?—３?Ｐ－＿｜?｜??ｎｅｇ?ｓｉＥＰＡＳＩ?Ｐ－ａｃｔｉｎ?￣?〇?〇??图３－１?ＳＰＣ上调ＥＰＡＳ１的表达，抑制心肌细胞的凋亡。??Ｈ９ｃ２去血清同时添加ＳＰＣ处理１２?ｈ?（Ａ）?ＱＰＣＲ和ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?（Ｂ）检测??ＥＰＡＳ１的变化。（Ｃ）免疫荧光检测ＥＰＡＳ１的核位移变化。（Ｄ）向Ｈ９ｃ２转染??３０??


本文编号：2963859