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miR-144靶向调控c-Fos对apoE -/- 小鼠动脉粥样硬化的影响

发布时间:2021-01-12 09:47
  目的:研究miR-144对巨噬细胞脂质蓄积和炎症反应的作用,探讨miR-144对动脉粥样硬化(atherosclerosis, As)的影响。方法:体外培养巨噬细胞,转染miR-144后,检测细胞内脂质蓄积,检测培养上清中炎症因子水平的水平;探讨miR-144是否与c-Fos 3 ’UTR靶向结合并抑制其表达;miR-144对巨噬细胞脂质蓄积及炎症因子分泌的作用及机制;miR-144对apoE-/-小鼠主动脉壁内脂质蓄积、血脂水平、As病变、c-Fos的表达水平和炎症因子表达高低的变化。结果:(一)实验结果表明,miR-144 mimic能够降低体外培养巨噬细胞内游离胆固醇、总胆固醇、以及细胞内脂滴体积和数量,miR-144的互补序列则可阻断以上效应,增加巨噬细胞内脂滴体积和数量,增加巨噬细胞内游离胆固醇和胆固醇酯的水平;酶联免疫实验证明miR-144 mimic明显降低巨噬细胞炎症因子包括IL-6、IL-1β、TNF-α的含量和水平,而miR-144反向核苷酸序列通过与miR-144的互补阻断miR-144的作用。(二)生物信息学分析发现miR-144具有靶向调控c-Fos的生物学基... 

【文章来源】:中国人民解放军医学院北京市

【文章页数】:96 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

miR-144靶向调控c-Fos对apoE -/- 小鼠动脉粥样硬化的影响


图1?miRNA生成过程??个miRNA存在生理功能,其中超过数百个,已通过克隆和复制序列,研宄了其生??理功能[26_27]

统计学意义,模拟物,转染,表达水平


实时定量PCR技术检测,结果发现,nnR-144的水平增加,说明外源性转染效率较??高,可以开始下一步实验。两种细胞表现出一致的结果。转染miR-144反义核苷酸??序列的组别则检测到的表达水平较低,和对照组相比有统计学差异(如图1.1,图??1.2所示)。??〇?4-|??'I?*??I:?|??i:Wum??,,,??,、/??图1.1?THP-1巨噬细胞转染miR-144模拟物后miR-144表达水平??注:和对照组相比*P?<?0.05认定有统计学意义;??和对照组相比#P?<?0.05认定有统计学意义;??24??

序列,模拟物,巨噬细胞,转染


转染miR-144模拟物及反义核苷酸序列后,用油红染色实验检测结果,发现人THP-1??巨噬细胞如果miR-144的水平较高则可以降低脂质水平,miR-144水平较低则巨噬??细胞内脂质含量较高。(如图1.3所示)。??control?negative??25??

【参考文献】:
期刊论文
[1]Activation of immediate-early response gene c-Fos protein in the rat paralimbic cortices after myocardial infarction[J]. Ji Yun Ahn,Hyun-Jin Tae,Jeong-Hwi Cho,In Hye Kim,Ji Hyeon Ahn,Joon Ha Park,Dong Won Kim,Jun Hwi Cho,Moo-Ho Won,Seongkweon Hong,Jae-Chul Lee,Jeong Yeol Seo.  Neural Regeneration Research. 2015(08)
[2]Computational Prediction of Micro RNAs from Toxoplasma gondii Potentially Regulating the Hosts’ Gene Expression[J]. Müs?erref Duygu Saar,Caner Bagc?,Jens Allmer.  Genomics,Proteomics & Bioinformatics. 2014(05)
[3]电针对心肌缺血模型大鼠孤束核c-fos表达及心电图STⅡ的影响[J]. 李江山,严洁,何军锋,彭娜.  针刺研究. 2009(03)
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[6]AngⅡ诱导的心肌肥大中c-fos,c-jun mRNA表达变化及丹参酮ⅡA的影响[J]. 周代星,梁黔生,何雪心,占成业.  中国中药杂志. 2008(08)



本文编号:2972632

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