冠心病血栓前状态相关危险因素分析和Zedoarondiol调控目标miRNA对炎症反应的作用

发布时间：2021-01-13 02:04

　　冠状动脉血栓形成是冠心病心血管事件发生的主要病理基础。在动脉粥样硬化血栓形成前,机体会处于利于血栓形成的高凝病理状态,即血栓前状态。分析冠心病血栓前状态相关的危险因素,探究冠心病血栓前状态的分子机理,可以为冠心病血栓前状态的识别和诊断提供有利的工具,可以有效地干预冠心病血栓前状态,对预防冠心病心血管事件的发生具有重要的临床意义。冠心病血栓前状态是血小板、微循环、炎症反应、凝血状态和纤溶系统等多种因素异常改变综合作用的结果。炎症反应是诱发冠状动脉内血栓形成的关键病理环节。CANTOS临床试验为炎症在动脉粥样硬化中的作用提供了明确的临床依据,心血管疾病进入了一个以炎症为靶向治疗的新时代。因此从炎症反应方面探索血栓前状态发生,对预防冠心病心血管事件具有重要意义。microRNA（miRNA）是一类内源性的进化高度保守的单链非编码小RNA,通过降解、抑制靶基因,影响蛋白翻译,在各种主要的生物过程中发挥重要作用。miRNA可以在冠心病的不同阶段被检测出,参与冠心病的发生及发展过程,因此筛选与冠心病血栓前状态相关的目标miRNA并探究其在血栓前状态中的作用,可为预防冠心病血栓前状态血栓形成提供实验... 

【文章来源】：中国中医科学院北京市

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Zedoarondiol化学结构图

１?ＬＰＳ浓度的筛选??用不同浓度（５０ｎｇ／ｍｌ、１００?ｎｇ／ｍｌ、２００?ｎｇ／ｍｌ、５００?ｎｇ／ｍｌ、１０００?ｎｇ／ｍｌ）的??ＬＰＳ刺激ＲＡＷ２６４．７细胞２４ｈ后，结果如图１显示，与对照组相比，ＬＰＳ?６个浓??度组均能明显升高ＩＬ－６的表达水平，差异有统计学差异（Ｐ＜０．０１）。后续实验选用??ＬＰＳ刺激效果稳定的２００ｎｇ／ｍｌ为最终浓度。??４００?＊＊?＊＊?＊＊?＊：?＊＊??３５０?????????．一?３００?／??Ｅ?２５０?／??含?２００?ｆ??．１５０?Ｚ??＾?１００?／??５０?／??０?響??０?５０?１００?２００?５００?１０００??ＬＰＳ浓度（ｎｇ／ｍｌ）??注：＊Ｐ?＜０．０５?ｖｓ．０ｎｇ／ｍｌ??图１．?ＬＰＳ不同浓度刺激ＲＡＷ２６４．７细胞ＩＬ－６表达水平??２?Ｚｅｄｏａｒｏｎｄｉｏｌ剂量的确定??２．１?Ｚｅｄｏａｒｏｎｄｉｏｌ对ＲＡＷ２６４．７细胞的增殖作用??用不同浓度的?Ｚｅｄｏａｒｏｎｄｉｏｌ?（５ｕｇ／ｍｌ、１０ｕｇ／ｍｌ、１５ｕｇ／ｍｌ、２０?ｕｇ／ｍｌ、２５?ｕｇ／ｍｌ、??３０?ｕｇ／ｍｌ）干预?ＲＡＷ２６４．７?细胞?２４ｈ?后，用?ＭＴＴ?法检测?Ｚｅｄｏａｒｏｎｄｉｏｌ?对?ＲＡＷ２６４．７??细胞的增殖作用。结果如图显示，５ｕｇ／ｍｌ组与对照组相比，差异无统计学意义??（Ｐ＞０．０５）；其余各浓度组与对照组比较，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）??＾?＜ｂ?＾?＾?ｒｐ?＾?＾??Ｚ????Ｚｅｄ?（ｕｇ／ｍｌ）??４２??

基于上述ＭＴＴ实验结果，选用不同浓度的Ｚｅｄｏａｒｏｎｄｉｏｌ?（５ｕｇ／ｍｌ、１０ｕｇ／ｍｌ、??１５ｕｇ／ｍｌ、２５?ｕｇ／ｍｌ），分别提前ｌｈ和２ｈ干预ＲＡＷ２６４．７炎症模型，用ＥＬＩＳＡ??法检测炎症因子ＩＬ－６的表达，结果如图３所示，与模型组比较，不同时间干预??下不同浓度的Ｚｅｄｏａｒｏｎｄｉｏｌ均能降低ＩＬ－６的表达水平（Ｐ＜０．０１）。Ｚｅｄｏａｒｏｎｄｉｏｌ??在不同浓度下提前干预ｌｈ均比提前干预２ｈ降低炎症因子ＩＬ－６表达水平的效果??显著，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。Ｚｅｄｏａｒｏｎｄｉｏｌ在浓度为１０ｕｇ／ｍｌ时能明显??降低了炎症因子ＩＬ－６的表达，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。故后续实验选用??Ｚｅｄｏａｒｏｎｄｉｏｌ浓度为１０ｕｇ／ｍｌ，干预时间为提前干预ｌｈ。??６００?＇??＊＊?氺氺??５００?＾??４００?＊＊?忭?一＾＾??３００??２００??１００??０??模型组?５?１０?２０?２５??２ｈ??注：＜０．０１ｖｓ．模型组，＃?Ｐ?＜０．０５ｖｓ．５ｕｇ／ｍｌ??图３．?Ｚｅｄｏａｒｏｎｄｉｏｌ不同浓度不同时间干预炎症模型ＩＬ－６的表达??３靶标ｍｉＲ－３４ａ在ＲＡＷ２６４．７细胞炎症模型及转染后的表达变化??如图４所示，与对照组比较，模型组在ＬＰＳ刺激ＲＡＷ２６４．７细胞后，ｍｉＲ－３４ａ??表达升高〇Ｐ＜０．０５）；该结果提示炎症反应会刺激ｍｉＲ－３４ａ的高表达。如图５所??不


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