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丹蒌片通过PI3K/Akt信号通路促血管内皮细胞增殖、迁移的机制研究

发布时间:2021-01-13 09:14
  目的以人动脉血管内皮细胞(HAEC)为培养模型,观察丹蒌片对细胞增殖、迁移的作用及其相关功能蛋白、信号通路蛋白的表达。探索丹蒌片促HAEC细胞增殖和迁移的可能机制。方法1.实验分组:本实验共分为五组,即血清饥饿组、空白对照组、丹蒌片组、可定组和混合组。每组由相应10%含药血清作用24小时后,进行后续实验。2.含药血清的制备:新西兰白兔16只,随机分为四组,每组4只。分别给予丹蒌片2.5g/kg/d、可定5mg/kg/d、丹蒌片2.5g/kg/d+可定5mg/kg/d灌胃,空白对照组以等体积生理盐水灌胃。连续灌胃5天后,腹主动脉采血,离心取上清,-70℃冰箱冻存备用。3.HAEC细胞增殖活力的测定:取指数生长期HAEC细胞,调整密度以2×103个/孔的密度接种于96孔板,完全贴壁后,无血清同步化24h。加不同10%含药血清作用24h,收集细胞培养上清于-70℃冰箱冻存备用。Cell Titer-Glo化学发光法测各组细胞增殖活力。4.HAEC细胞迁移能力的测定:取指数生长期HAEC细胞,调整细胞密度为1×105个/ml,取200μl单细胞悬液接种Transwell小室上层。各组小室下层加... 

【文章来源】:河南中医药大学河南省

【文章页数】:74 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
前言
材料与方法
    1.实验材料
    2.实验方法与步骤
    3.统计学处理
结果
    1.细胞形态学观察
    2.细胞生长曲线
    3.细胞增殖活力
    4.细胞迁移能力
    5.细胞周期分布
    6.各组细胞VEGF、SDF-1、e NOS的表达
    7.各组细胞PCNA、Cyclin D1、CDK4、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达水平的变化
讨论
    1.丹蒌片对ECs增殖活力、细胞周期及其相关蛋白的影响
    2.丹蒌片对ECs迁移及其分泌VEGF和SDF-1 的影响
    3.丹蒌片对e NOS-NO系统的影响
    4.丹蒌片对ECs磷脂酰肌醇 3-激酶/蛋白激酶B信号通路的影响
结论
致谢
参考文献
附录1 文献综述
    参考文献
附录2 在校期间科研情况和论文著作


【参考文献】:
期刊论文
[1]支架内新生动脉粥样硬化研究进展[J]. 罗明华,王贺,关怀敏.  中国循环杂志. 2014(10)
[2]中国心血管病报告2013概要[J]. 陈伟伟,高润霖,刘力生,朱曼璐,王文,王拥军,吴兆苏,胡盛寿.  中国循环杂志. 2014(07)
[3]活性氧对血府逐瘀汤诱导人脐静脉内皮细胞迁移作用的影响[J]. 林凡,郑跃文,陈斌玲,于江燕,詹炳汇,上官江远,高冬.  时珍国医国药. 2014(02)
[4]冠心病介入术后中医证候学研究概况[J]. 李光辉,张军平,吕仕超,彭立.  中华中医药学刊. 2013(11)
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[8]应用光学相干断层成像评价药物洗脱支架术后再发急性冠脉综合征患者的原因[J]. 陈玉善,张金盈,关怀敏,解金红,邱承杰.  医药论坛杂志. 2013(08)
[9]冠心病痰瘀证客观指标的临床研究[J]. 靳宏光,齐锋,王义强,赵明,陈颖,李哲山.  世界科学技术-中医药现代化. 2013(05)
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博士论文
[1]雷帕霉素抑制内皮细胞增殖和迁移:PI3K/Akt/mTOR/p70S6K信号通路的作用[D]. 刘海涛.第四军医大学 2010
[2]冠心病介入治疗前后中医证候特征及客观化研究[D]. 任毅.广州中医药大学 2009



本文编号:2974627

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