缺氧/复氧诱导人脐静脉内皮细胞释放的微囊泡对离体大鼠胸主动脉环舒张功能的影响

发布时间：2021-01-18 20:43

　　血管内皮功能紊乱是多种心血管疾病致病机制的起始及核心环节,是急性心肌梗死,动脉粥样硬化等心血管疾病的致病基础。研究表明,糖尿病、动脉粥样硬化、心肌缺血等心血管疾病的患者循环血液中MVs水平上升,这些MVs中包含内皮细胞在受到刺激或凋亡时所释放的EMVs。EMVs并非简单的生物学标志物,它们同时在血管内皮功能紊乱的致病机制中发挥着重要作用。不同病理状态下产生的EMVs具有不同的生物学功能。I/R作为多种心血管疾病的病理生理基础,可引起血管内皮功能紊乱及凋亡坏死。但有关H/R诱导产生的H/R-EMVs是否在血管内皮功能紊乱中发挥作用以及H/R-EMVs是否可以削弱离体大鼠胸主动脉环的内皮依赖性舒张反应尚不清晰。因此,本实验拟通过H/R诱导HUVECs产生EMVs,探讨H/R-EMVs对离体大鼠胸主动脉环舒张功能的影响。目的:研究H/R-EMVs对离体大鼠胸主动脉环舒张功能的影响及其相关机制。方法:1.H/R诱导HUVECs损伤模型的建立用含10%FBS的DMEM培养基培养HUVECs 24 h达到融合70-80%后,弃去培养上清液,换用缺氧液。将HUVECs放置于缺氧装置中,使用95%N2... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：91 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语
前言
    研究现状及成果
    研究目的、方法
一、H/R-EMVs的分离提取及鉴定
    1.1 实验材料
        1.1.1 细胞
        1.1.2 实验仪器
        1.1.3 实验耗材与器材
        1.1.4 药品与试剂
    1.2 实验方法
        1.2.1 主要溶液的配制
        1.2.2 HUVECs的复苏、传代与冻存
        1.2.3 MTT法检缺氧 12 h复氧 4 h HUVECs的存活率
        1.2.4 H/R方法诱导HUVECs释放MVs
        1.2.5 H/R-EMVs的流式鉴定和计数
        1.2.6 H/R-EMVs的蛋白定量（BCA法）
        1.2.7 数据处理
    1.3 结果
        1.3.1 H/R诱导HUVECs损伤模型的建立
        1.3.2 H/R-EMVs的流式鉴定和计数结果
        1.3.3 H/R-EMVs的蛋白定量
    1.4 小结
二、H/R-EMVs对离体大鼠胸主动脉环舒张功能的影响及相关机制的研究
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验仪器
        2.1.3 实验耗材与器械
        2.1.4 药品与试剂
    2.2 实验方法
        2.2.1 主要溶液的配制
        2.2.2 H/R-EMVs处理离体大鼠胸主动脉环
        2.2.3 离体大鼠胸主动脉环实验
        2.2.4 离体大鼠胸主动脉环的冻存及组织匀浆
        2.2.5 离体大鼠胸主动脉环NO的测定
        2.2.6 离体大鼠胸主动脉环p-eNOS/t-eNOS的测定
        2.2.7 离体大鼠胸主动脉环SOD, MDA的测定
        2.2.8 数据处理
    2.3 结果
        2.3.1 H/R-EMVs对ACh、SNP介导的离体大鼠胸主动脉环舒张功能的影响
        2.3.2 H/R-EMVs对NO含量的影响
        2.3.3 H/R-EMVs对离体大鼠胸主动脉环中p-eNOS/t-eNOS含量的影响
        2.3.4 H/R-EMVs对离体大鼠胸主动脉环中SOD, MDA含量的影响
    2.4 小结
讨论
    1 MVs的生物学作用
    2 H/R-EMVs的分离及鉴定
        2.1 H/R-EMVs的分离及提取
        2.2 H/R-EMVs的流式检测及表型鉴定
    3 H/R-EMVs对离体大鼠胸主动脉环舒张率的影响
    4 H/R-EMVs对离体大鼠胸主动脉环NO含量的影响
    5 H/R-EMVs对离体大鼠胸主动脉环中p-eNOS/t-eNOS的影响
    6 H/R-EMVs对离体大鼠胸主动脉环中SOD活性及MDA含量的影响
    7 总结与展望
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述
    参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]人骨髓间充质干细胞释放膜微囊条件探索[J]. 毕晓云,黄舒,陈晶砺,王芳,王燕,郭子宽.  中国实验血液学杂志. 2014(02)
[2]Effects of endothelial microvesicles induced by A23187 on H9c2 cardiomyocytes[J]. Man SHANG,Qi ZHANG,Meng-xiao ZHANG,Yao WANG,Yan CHEN,Yan-na WU,Jun-qiu SONG,Ming-lin LIU,Yan-xia LIU.  中国应用生理学杂志. 2013(06)
[3]饮食诱导糖调节受损大鼠睾丸细胞抗氧化水平、细胞周期进程和凋亡的变化[J]. 方芳,张桂英,高田林,肖宛凝,刘宇欣,刘娅,王志成.  中华男科学杂志. 2013(05)



本文编号：2985638