原发免疫性血小板减少症患者血浆外泌体的蛋白组学测定及microRNA测序分析

发布时间：2021-02-07 08:12

　　研究背景原发免疫性血小板减少症（immune thrombocytopenia,ITP）是一种获得性的自身免疫性疾病,其特征表现为孤立的血小板减少症。本病常病情迁延且容易复发,其发病机制亦尚未完全明确,为疾病的明确诊断和药物的研发带来困难。外泌体是一种小型的细胞外膜性囊泡,最近的研究揭示了其在信号传递和免疫调节方面的重要意义。研究发现外泌体可参与多种自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等的发病过程,这提示我们外泌体可能也同样参与了 ITP的发病机制。本研究针对ITP患者的血浆外泌体进行蛋白组学测定及microRNA测序分析,可以帮助我们更好的理解ITP的发病机制,并可能为将来提供新的治疗靶点。目的对比原发免疫性血小板减少症患者与健康对照者在血浆外泌体蛋白组学表达谱、microRNA测序表达谱之间存在的差异,发掘潜在发病机制及治疗靶点。方法所有研究对象均严格按照入组标准纳入本研究。对原发免疫性血小板减少症患者与健康对照者进行空腹采血并按照规范流程提取血浆外泌体。通过透射电子显微镜分析、Western Blot蛋白印迹分析、纳米颗粒示踪分析验证所提取外泌体,并与相关合作单位协同进... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
符号说明
第一章 前言
第二章 实验方法与对象
    2.1 受试者选择
        2.1.1 患者入组标准
        2.1.2 患者排除标准
        2.1.3 健康对照者入组标准
    2.2 研究方法
        2.2.1 血液标本的准备
        2.2.2 血浆外泌体的制备
        2.2.3 透射电子显微镜分析
        2.2.4 Western Blot蛋白印记分析
        2.2.5 纳米颗粒示踪分析（NTA）
        2.2.6 蛋白质质谱分析
        2.2.7 microRNA表达测序分析
第三章 结果
    3.1 基本临床信息
    3.2 从血浆标本中分离及验证外泌体
    3.3 蛋白标本的质量控制
    3.4 外泌体蛋白的识别鉴定
    3.5 外泌体差异性表达蛋白的基因本体论（GO）分析
    3.6 载脂蛋白E的KEGG通路分析
    3.7 miRNA测序的质量控制
    3.8 外泌体miRNA的识别鉴定
    3.9 外泌体内差异显著的miRNA的基因本体论（GO）分析
    3.10 外泌体中差异显著的miRNA的KEGG通路分析
第四章 讨论
    4.1 载脂蛋白E
    4.2 microRNA
        4.2.1 ITP患者外泌体中表达下调的microRNA
        4.2.2 ITP患者外泌体中表达上调的microRNA
    4.3 本实验的局限性
第五章 结论
参考文献
致谢
学位论文评阅及答辩情况表



本文编号：3021948