基于螺旋阳离子聚多肽的siRNA递送体系用于心肌缺血再灌注损伤的治疗研究
发布时间：2021-02-13 04:22
心肌缺血再灌注（ischemia reperftusion,IR）常常发生于临床心血管手术及心梗的治疗过程中,可导致不可逆的组织损伤。在IR损伤过程中,促炎因子持续上调引起过度的炎症反应,会加重组织细胞损伤。与此同时,心肌细胞有限的增殖分化能力限制了心脏组织的再生修复,进一步促使细胞凋亡、胶原沉积,最终阻碍心脏的修复。目前临床上通常使用小分子抑制剂进行IR损伤的治疗,但潜在的副作用以及高昂的治疗成本大大限制了其在临床治疗中的应用。基因治疗,特别是RNA干扰技术（RNAi）,具有特异性强、治疗效率高等特点,被广泛应用于多种疾病的治疗。通过递送siRNA下调炎症因子的表达,可以抑制损伤后过激的炎症反应,亦或抑制心肌细胞凋亡,促进细胞再生修复,重塑心脏组织处失衡的微环境。这两种方法均可阻遏心脏由急性心肌梗塞发展为心脏衰竭的过程,从而达到治疗IR损伤的目的。基因治疗的关键在于高效、低毒的基因递送载体的构建。以细胞穿膜肽为基础的α螺旋阳离子聚多肽具有较强的穿膜活性,可介导高效的跨膜基因药物递送,从而促进基因转染,达到治疗疾病的目的。此外,体内稳定性是阳离子载体用于基因递送的另一挑战,通过细胞膜包...
【文章来源】：苏州大学江苏省
【文章页数】：112 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．３非病毒载体体内基因药物递送的屏障［２６］
第一章?基于螺旋阳离子聚多肽的ｓｉＲＮＡ递送体系用于心肌缺血再灌注损伤的治疗研究??１．３．２．１脂质体??脂质体是由两性分子，如磷脂（卵磷脂、棕榈酰磷脂酰胆碱）形成的具有双分??子层结构的封闭型囊泡，由一个水溶性内核和外层疏水膜构成，可以高效包载亲疏??水药物分子。其次，脂质体具有与生物膜类似的双分子层膜结构，可通过膜融合的??方式将药物递送进细胞（图１．４）?［３１，３２］。目前，己有多种商业化脂质体试剂应用??于基因递送，包括?ＲＮＡｉｆｅｃｔ?Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ?（Ｑｉａｇｅｎ）、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ?（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）等??［３３］。然而，由于脂质体不易在体内降解，因此具有较高的细胞毒性，同时脂质体??介导的药物递送存在非特异性细胞摄取等缺点，大大限制了其在体内安全、有效的??应用。??＾?Ｔａｒｇｅｔｅｄ?ｒｅｃｅｐｔｏｒ?ｂ??ＴｒｉｔｏｎＸ－１００?？?Ｄｒｕ９?＾?＾??Ｓｏｄｉｕｍ?Ｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ?＾?Ｖ－?４??Ｆｉｇｕｒｅ?１．４?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｂｉｏｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｚｅｄ?ｌｉｐｏｓｏｍｅ－ｌｉｋｅ?ｎａｎｏｖｅｓｉｃｌｅ?（ＢＬＮ）??ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ［３２］．??图１．４生物功能化类脂质体纳米囊泡（ＢＬＮ）的制备［３２］。??１．３．２．２阳离子聚合物??离子聚合物可通过静电作用稳定包载带有负电性的核酸分子，提高其在细胞??内的递送效率，是非病毒基因载体最重要的分类之一。常用的阳离子聚合物包括聚??赖氨酸（ｐｏｌｙ（ｌｙｓｉｎｅ），?ＰＬＬ）、聚乙稀亚胺（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｉｍｉｎｅ，?ＰＥＩ）、
ａｍｉｎｅ?（ＰＡＭＡＭ）?ｄｅｎｄｒｉｍｅｒ－ＧＩ?ｐｏｌｙ＜Ｌｈｉｓｌｉｎ￡）?ｐｏｌｙ（屮?ａｍｉｎｏ?ｅｓｔｅｒ）ｓ??咖？哟?ＣＰＨｌｓ）〇?（ＰＢＡＥＯ??Ｗ?〇＼＾°?［Ｓ?Ｘ］?。?。??１?ｌ?ｌ?ｌｎ??一。Ｈ／。。Ｘ＞??Ｎ?ＮＨ，?Ｎ??Ｏ＾ｉ?ｋ＾Ｏ??ＨｊＮ?？ＮＨ?ＨＮ，ＮＨｊ??Ｆｉｇｕｒｅ?１．５?Ｃｈｅｍｉｃａｌ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ?ｏｆ?ｃａｔｉｏｎｉｃ?ｐｏｌｙｍｅｒｓ?ｆｏｒ?ｇｅｎｅ?ｄｅｌｉｖｅｒｙ［３４］．??图１．５用于基因递送的阳离子聚合物的化学结构式［３４］。??ＰＬＬ是最早应用于基因递送的阳离子聚合物，本质是生物可降解的多肽，在体??内应用方面具有很大的优势［３８］。然而ＰＬＬ与核酸分子形成的复合物会与血浆中??的蛋白结合，并从循环系统中清除。此外，该复合物通过内吞作用进入细胞后，易??被内含体／溶酶体捕获，使核酸分子不能顺利释放，导致转染效率的大幅降低。为??了降低ＰＬＬ的系统毒性，增强复合物的内含体逃逸能力，通常利用氯唾、膜破坏??性肽或咪唑等修饰，或与ＰＥＩ、聚乳酸－羟基乙酸（ＰＬＧＡ）等聚合物形成共聚物，??来提高ＰＬＬ的基因转染效率［３９，?４０］。??ＰＥＩ是最常用的基因载体，其质子化后电荷密度较高，可以通过“质子海绵效??应”介导复合物逃避内含体／溶酶体，因此展现出强有力的基因转染能力［４卜４４］。??ＰＥＩ与核酸分子的结合能力、基因递送效率与其分子量息息相关。低分子量的ＰＥＩ??的电荷密度较小，不能紧密结合核酸分子，影响其基因递送效率。高分子量的ＰＥＩ??可以介导更高效的基因转染，但是随之增加的正电荷密度也会对细胞产生损伤，
本文编号：3031966
【文章来源】：苏州大学江苏省
【文章页数】：112 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．３非病毒载体体内基因药物递送的屏障［２６］
第一章?基于螺旋阳离子聚多肽的ｓｉＲＮＡ递送体系用于心肌缺血再灌注损伤的治疗研究??１．３．２．１脂质体??脂质体是由两性分子，如磷脂（卵磷脂、棕榈酰磷脂酰胆碱）形成的具有双分??子层结构的封闭型囊泡，由一个水溶性内核和外层疏水膜构成，可以高效包载亲疏??水药物分子。其次，脂质体具有与生物膜类似的双分子层膜结构，可通过膜融合的??方式将药物递送进细胞（图１．４）?［３１，３２］。目前，己有多种商业化脂质体试剂应用??于基因递送，包括?ＲＮＡｉｆｅｃｔ?Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ?（Ｑｉａｇｅｎ）、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ?（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）等??［３３］。然而，由于脂质体不易在体内降解，因此具有较高的细胞毒性，同时脂质体??介导的药物递送存在非特异性细胞摄取等缺点，大大限制了其在体内安全、有效的??应用。??＾?Ｔａｒｇｅｔｅｄ?ｒｅｃｅｐｔｏｒ?ｂ??ＴｒｉｔｏｎＸ－１００?？?Ｄｒｕ９?＾?＾??Ｓｏｄｉｕｍ?Ｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ?＾?Ｖ－?４??Ｆｉｇｕｒｅ?１．４?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｂｉｏｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｚｅｄ?ｌｉｐｏｓｏｍｅ－ｌｉｋｅ?ｎａｎｏｖｅｓｉｃｌｅ?（ＢＬＮ）??ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ［３２］．??图１．４生物功能化类脂质体纳米囊泡（ＢＬＮ）的制备［３２］。??１．３．２．２阳离子聚合物??离子聚合物可通过静电作用稳定包载带有负电性的核酸分子，提高其在细胞??内的递送效率，是非病毒基因载体最重要的分类之一。常用的阳离子聚合物包括聚??赖氨酸（ｐｏｌｙ（ｌｙｓｉｎｅ），?ＰＬＬ）、聚乙稀亚胺（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｉｍｉｎｅ，?ＰＥＩ）、
ａｍｉｎｅ?（ＰＡＭＡＭ）?ｄｅｎｄｒｉｍｅｒ－ＧＩ?ｐｏｌｙ＜Ｌｈｉｓｌｉｎ￡）?ｐｏｌｙ（屮?ａｍｉｎｏ?ｅｓｔｅｒ）ｓ??咖？哟?ＣＰＨｌｓ）〇?（ＰＢＡＥＯ??Ｗ?〇＼＾°?［Ｓ?Ｘ］?。?。??１?ｌ?ｌ?ｌｎ??一。Ｈ／。。Ｘ＞??Ｎ?ＮＨ，?Ｎ??Ｏ＾ｉ?ｋ＾Ｏ??ＨｊＮ?？ＮＨ?ＨＮ，ＮＨｊ??Ｆｉｇｕｒｅ?１．５?Ｃｈｅｍｉｃａｌ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ?ｏｆ?ｃａｔｉｏｎｉｃ?ｐｏｌｙｍｅｒｓ?ｆｏｒ?ｇｅｎｅ?ｄｅｌｉｖｅｒｙ［３４］．??图１．５用于基因递送的阳离子聚合物的化学结构式［３４］。??ＰＬＬ是最早应用于基因递送的阳离子聚合物，本质是生物可降解的多肽，在体??内应用方面具有很大的优势［３８］。然而ＰＬＬ与核酸分子形成的复合物会与血浆中??的蛋白结合，并从循环系统中清除。此外，该复合物通过内吞作用进入细胞后，易??被内含体／溶酶体捕获，使核酸分子不能顺利释放，导致转染效率的大幅降低。为??了降低ＰＬＬ的系统毒性，增强复合物的内含体逃逸能力，通常利用氯唾、膜破坏??性肽或咪唑等修饰，或与ＰＥＩ、聚乳酸－羟基乙酸（ＰＬＧＡ）等聚合物形成共聚物，??来提高ＰＬＬ的基因转染效率［３９，?４０］。??ＰＥＩ是最常用的基因载体，其质子化后电荷密度较高，可以通过“质子海绵效??应”介导复合物逃避内含体／溶酶体，因此展现出强有力的基因转染能力［４卜４４］。??ＰＥＩ与核酸分子的结合能力、基因递送效率与其分子量息息相关。低分子量的ＰＥＩ??的电荷密度较小，不能紧密结合核酸分子，影响其基因递送效率。高分子量的ＰＥＩ??可以介导更高效的基因转染，但是随之增加的正电荷密度也会对细胞产生损伤，
本文编号：3031966
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/xxg/3031966.html
最近更新
教材专著
