miR-217靶向SPRY1调控血管内皮细胞增殖和凋亡的分子机制

发布时间：2021-02-19 19:35

　　目的探讨miR-217对血管内皮细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法运用25μmol/ml高糖建立血管内皮细胞EAhy926损伤;运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）检测细胞中miR-217、软脂酰化磷蛋白（SPRY1）的表达;将HG+anti-miR-con组（转染anti-miR-con）、HG+anti-miR-217组（转染anti-miR-217）、HG+pcDNA组（转染pcDNA）、HG+pcDNA-SPRY1组（转染pcDNA-SPRY1）、HG+anti-miR-217+si-con组（共转染anti-miR-217和si-con）、HG+anti-miR-217+si-SPRY1组（共转染anti-miR-217和si-SPRY1）用脂质体法转染至EAhy926细胞,再用高糖处理;Western印迹检测细胞中SPRY1、细胞周期蛋白依靠性激酶抑制剂（p21）、B细胞淋巴瘤/白血病（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）的蛋白表达;噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶（Annexin V-FITC/PI）双染法检... 

【文章来源】：中国老年学杂志. 2020,40(20)北大核心

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 细胞培养
    1.3 细胞模型的建立与分组
    1.4 qRT-PCR实验检测miR-217、SPRY1表达
    1.5 Western印迹实验检测细胞SPRY1、p21、Bax、Bcl-2蛋白表达
    1.6 MTT法检测细胞增殖
    1.7 Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡
    1.8 生物信息学分析
    1.9 双荧光素酶报告基因实验验证miR-217与SPRY1的靶向结合
    1.10 统计学处理
2 结 果
    2.1 高糖诱导对人脐静脉内皮细胞中miR-217和SPRY1表达的影响
    2.2 抑制miR-217调控高糖诱导对人脐静脉内皮细胞增殖
    2.3 抑制miR-217调控高糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡
    2.4 miR-217靶向SPRY1
    2.5 过表达SPRY1调控高糖诱导的人脐静脉内皮细胞增殖凋亡
    2.6 干扰miR-217和沉默SPRY1对高糖诱导人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响
    2.7 抑制miR-217联合沉默SPRY1调控高糖诱导人脐静脉内皮细胞增殖相关蛋白和凋亡相关蛋白
3 讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]外泌体来源微小RNA在心血管疾病中作用研究进展[J]. 潘益凯,孙喜庆.  心脏杂志. 2018(04)
[2]高糖诱导内皮细胞损伤microRNA表达紊乱的体外研究[J]. 刘宇,曹清心,于曼丽,张必利,石屹城,崔玲,赵仙先.  现代生物医学进展. 2015(13)
[3]Spry1和MAPK蛋白在病毒性心肌炎心肌组织中的表达[J]. 许弘飞,孟林,姚健,谷振勇,刘国庆,沈忆文,赵子琴.  法医学杂志. 2013(03)
[4]辛伐他汀抑制高糖诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡[J]. 徐茂凤,李永杰,王婉丽.  中国组织工程研究与临床康复. 2011(41)



本文编号：3041585