阿司匹林调控生长分化因子15蛋白表达对心肌细胞缺氧/复氧损伤保护作用及作用机制的初步研究

发布时间：2021-03-06 02:50

　　心肌缺血再灌注（I/R）损伤是心脏缺血恢复血流灌注后损伤加重的现象,其损伤细胞死亡本质与细胞凋亡相关。近年来发现在心绞痛冠脉解痉、心肺脑复苏等情况下均有I/R发生,是造成术后病人病情恶化的重要原因之一,因此寻找减轻I/R的方法已成为一个新的研究热点。GDF15作为一种应激反应蛋白,生理情况下在前列腺和胎盘中高表达,在其他大多数组织中微量表达;但在生理病理和环境应激情况下,如I/R损伤、动脉粥样硬化、心脏高压力负荷和心力衰竭,GDF15在心肌细胞中均大量表达,对心肌细胞的结构和凋亡发挥调节作用。因此,GDF15可以被看做心血管疾病的标志物。目的:首先构建GDF15慢病毒表达载体,包装病毒,建立GDF15稳定过表达的心肌细胞株,之后检测GDF15蛋白对H9c2心肌细胞缺氧/复氧（H/R）损伤凋亡的保护性作用及对自噬的影响;继而阿司匹林（Asp）预处理观察H9c2心肌细胞H/R后GDF15的表达水平,以及Asp通过提高GDF15蛋白表达对细胞凋亡的保护性作用和对自噬的影响。明确GDF15蛋白以及Asp心肌保护作用的机制,为其临床应用提供理论依据。方法:第一部分1.GDF15稳定过表达细胞株H... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

GDF15TA克隆酶切电泳，酶切后目的条带大小为912bp，条带位置正确Fig.1-5GDF15TAcloningdigestionelectrophoresis,digestionafterthetargetbandsizeof912bp,strippositioniscorrect1000bp

GDF15-EF1-Puro 质粒酶切电泳，酶切后目的条带大GDF15-EF1-Puro plasmid was digested by restriction eas 912 bp, and the band position was correct前一条带为酶切后的 pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro 载带AC 1-EF1-Puro 测序的 pCDH-CMV-GD15-EF1-Puro 质粒送 500 μ进行测序。GDF15 基因测序结果与 NCBI 检索两序列完全匹配。证明 GDF15 重组慢病毒质装和功能研究（图 1-7）。

图 1-6 pCDH-CMV-GDF15-EF1-Puro 质粒酶切电泳，酶切后目的条带大小 912 bp，条带位置正确Fig. 1-6 PCDH-CMV-GDF15-EF1-Puro plasmid was digested by restriction enzyme digestion.The size of the band was 912 bp, and the band position was correct注：A：Marker；B：前一条带为酶切后的 pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro 载体，后一条带为酶切后的 GDF15 目的条带2. pCDH-CMV--HDAC 1-EF1-Puro 测序酶切鉴定正确的 pCDH-CMV-GD15-EF1-Puro 质粒送 500 μL 菌液由金唯智生物科技有限公司进行测序。GDF15 基因测序结果与 NCBI 检索后大鼠 GDF15序列 Blast 比对，两序列完全匹配。证明 GDF15 重组慢病毒质粒构建成功，可用于后续慢病毒包装和功能研究（图 1-7）。1000 bp

【参考文献】：
期刊论文
[1]阿司匹林抑制NF-κB激活减轻心肌缺血再灌注损伤[J]. 汪永义,薛松,刘沙,萧明第.  医学研究生学报. 2003(02)
[2]大鼠局灶性脑缺血后─氧化氮合酶活性与细胞凋亡关系[J]. 韩群颖,顾振,王鹤鸣,彭滔,苏殿三.  南京医科大学学报(自然科学版). 2002(02)



本文编号：3066309