Fractalkine在血管紧张素Ⅱ诱导内皮细胞ICAM-1表达中的作用

发布时间：2021-03-11 14:48

　　目的：观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）细胞活力及Fractalkine（FKN）和细胞间粘附分子-1（ICAM-1）蛋白表达的影响,通过小RNA干扰技术阻断内皮细胞FKNmRNA的表达,研究FKN在AngⅡ诱导内皮细胞ICAM-1蛋白表达中的作用。方法：取生长良好的HUVECs,分别给予低（10-7mol/l）、高（10-6mol/l）浓度的AngⅡ干预0、12、24、48小时,采用MTT法检测内皮细胞活力,Western blotting法检测ICAM-1和FKN蛋白的表达；采用小RNA干扰技术,根据FKN mRNA序列,选择3个靶点,合成3条FKN siRNA片段,通过脂质体（lipofectamine2000）转染至内皮细胞,实时荧光定量PCR （Real-Time PCR）检测内皮细胞FKNmRNA表达情况并筛选出有效片段；采用有效的FKN siRNA片段转染内皮细胞后,通过高浓度AngⅡ（10-6mol/l）干预24小时,RT-PCR检测各组内皮细胞FKN mRNA表达,Western blotting法检测内皮细胞ICAM-1及FKN蛋白的表达... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

MTT法检测Angll对内皮细胞活力的影响

硕士学位论文 3结果3.5不同作用时间血管紧张素II对内皮细胞ICAM-1蛋白表达的影响给予浓度为l(r6mom的Angll分别处理HUVECs细胞0、12、24、48小时，收集内皮细胞，Western blotting法检测ICAM-1蛋白。与对照组(0小时)相比，各组ICAM-1蛋白表达均显著增高。见图4。a lo C d

硕士学位论文 3结果3.10 FKN siRNA转染对Angll诱导内皮细胞ICAM-1蛋白表达影响内皮细胞经FKN siRNA-lipo2000转染6小时后，予以Angll (10"W/1)干预24小时,并通过Western blotting检测ICAM-1蛋白表达。与阴性对照+AngII组相比，FKNsiRNA+Angll组内皮细胞ICAM-1蛋白表达显著降低。见图8。


本文编号：3076637