RNA干扰沉默基质交感分子1减轻H9C2细胞缺氧/复氧损伤

发布时间：2021-03-27 23:44

　　目的 众所周知,急性心肌梗死已成为严重危害人类健康的常见病。再灌注治疗可以使缺血的组织重新获得血液供应,从而使该区域组织获得有效的救治,因此再灌注疗法是治疗心肌梗死的最重要的方法。但由于心肌缺血-再灌注损伤（MIRI）的存在,在一定程度上限制了再灌注治疗的疗效,因此如何降低MIRI,现如今在心血管系统疾病研究中,已成为重点及热点问题。基质交感分子1（STIM1）是细胞内质网膜上的跨膜蛋白,研究发现STIM1及其下游信号因子广泛存在心血管系统中,并且调控着细胞的多种生物学行为。本研究主要是探讨沉默基质交感分子1对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响。方法 培养H9C2心肌细胞,建立心肌细胞缺氧复氧（H/R）模型,将培养的细胞随机分成4组:对照组（Control组）;缺氧/复氧组（H/R组）;缺氧/复氧+STIM1-si RNA组（H/R+STIM1-si RNA组）;缺氧/复氧+scramble si RNA组（H/R+scramble si RNA组）。利用STIM1-si RNA转染H9C2心肌细胞以下调STIM1表达。流式细胞技术检测各组细胞凋亡率,Western blot法检测各... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

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英文缩略词表
摘要
Abstract
1 引言
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 H9C2细胞株
        2.1.2 实验仪器
        2.1.3 主要实验试剂
    2.2 实验方法
        2.2.1 H9C2心肌细胞的培养
        2.2.2 实验分组
        2.2.3 建立H9C2心肌细胞H/R模型
        2.2.4 siRNA构建及验证
        2.2.5 siRNA转染细胞干扰H9C2心肌细胞中STIM1的表达
        2.2.6 流式细胞技术检测H9C2心肌细胞经过不同的处理后所表现的凋亡情况
2+浓度">        2.2.7 Fluo3-AM荧光探针检测细胞内Ca²⁺浓度
        2.2.8 RT-PCR检测Stim1 mRNA的水平
        2.2.9 Western blot法检测STIM1-siRNA转染效率及凋亡相关蛋白的表达情况
    2.3 统计学方法
3 结果
    3.1 siRNA对H9C2心肌细胞STIM1 mRNA和蛋白表达的影响
    3.2 各组H9C2心肌细胞STIM1的表达
    3.3 STIM1-siRNA转染后H9C2心肌细胞凋亡的变化
2+浓度的影响">    3.4 STIM1-siRNA转染对H9C2心肌细胞Ca²⁺浓度的影响
    3.5 STIM1-siRNA转染对H9C2心肌细胞Bax、Bcl-2、caspase-3表达的影响
4 讨论
5 结论
6 参考文献
附录
致谢
综述
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]天麻素预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的可能机制[J]. 位凯,王飞,张瑾,李珍,沈兵,王烈成,孔德虎,胡金兰.  安徽医科大学学报. 2014(06)



本文编号：3104457