心脏缺血再灌注损伤及药物保护进展的作用机制研究

发布时间：2021-03-28 00:00

　　背景:通过及时的再灌注干预手段治疗急性心肌梗死（AMI）很大程度上提高了冠心病患者的生存预后。但是,仅开通心外膜血管,有时并不能改善病人的真正预后。因此,该研究将聚焦于心脏的再灌注损伤的机制研究和药物干预手段。微循环是心脏血供的最末端,是感应缺血缺氧最敏感的部分,因此微循环的内皮细胞和心肌细胞是作为该研究的重点。我们前期研究提示细胞内钙超载和过量活性氧生成是造成一系列损伤的启动因素。SERCA2a作为最重要的内质网上钙回收蛋白被广泛进行研究。前期研究证实在IR条件下,SERCA2a活性降低,导致细胞内超载损伤。其他研究有提示SERCA2a的转录后修饰是其活性降低的主要因素。因此我们首先将聚焦于心脏缺血再灌注（IR）条件下SERCA2a的转录后修饰作用。因此,更深一步研究将聚焦于SERCA2a诱导的细胞钙超载,是否与线粒体损伤性分裂,以及线粒体钙超载导致的线粒体凋亡程序启动有直接相关性。除此以外,该团队前期研究发现,褪黑素对微循环缺血再灌注损伤有保护作用,因此针对线粒体的研究,我们力求完善褪黑素保护IR损伤后的线粒体结构功能的机制研究。目的:本研究旨在阐明心肌缺血再灌注介导微循环损伤的分... 

【文章来源】：中国人民解放军医学院北京市

【文章页数】：94 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１：于小鼠心脏的ＩＲＩ模型中，观察ＳＥＲＣＡ２ａ的表达和小鼠心功能改变

图２：?ＳＥＲＣＡ２ａ的恢复减轻了微循环ＩＲ损伤和微血管再灌注缺损。Ａ－Ｂ：?ＤＨＥ荧光染色??缺血２小时再灌注１０小时，观察不同分组荧光的强度；Ｃ－Ｆ：缺血２小时后再灌注１０小时，??抽取尾静脉血，检测各项指标；Ｇ－Ｊ：?ＳＥＲＣＡＣ６７４－Ｓ０３Ｈ特异性抗体被用于免疫组化??染色检测其在不同组左心室梗死区的表达；ＳＥＲＣＡ２ａ与硝基酪氨酸和ＳＥＲＣＡ２ａ与ＧＳＨ??通过免疫共沉淀测定法检测共表达水平；全蛋白质印迹分析谱检测完整的ＵＯｋＤａ??ＳＥＲＣＡ２ａ蛋白在不同的组中的降解情况。＊ｐ＜０．０５ｖｓ．正常野生小鼠组；＃ｐ＜０．０５ｖｓ．野??生小鼠ＩＲ损伤组。??３．３体内过表达ＳＥＲＣＡ２ａ，观察小鼠微循环结构和功能完整性的影响??构建ＳＥＲＣＡ２ａ病毒转染的过表达基因鼠（ＳＥＲＣＡ２ａＡＶＶｍｉｃｅ）完成后，我??们使用缺血２小时再灌注１０小时建立体外ＩＲ损伤模型，观察微循环受损情况。??２１??

?解放军医学院博士论文???野生小鼠ＩＲ组显示红细胞（ＲＢＣ）的排列异常（如图２Ｅ），尤其可见红细胞微??血栓，而ＳＥＲＣＡ２ａＡＶＶ组可将ＲＢＣ排列形态逆转为降落伞常规形状。至于血管??完整性和微血管功能，ＳＥＲＣＡ２ａＡＶＶ调节的ＩＲ诱导增加ＩＣＡＭ－１的表达或微循??环内皮细胞的ｅＮＯＳ释放减少（图２Ｃ－Ｆ）。该受损的微血管受到ＩＲ组中分散的??ＣＤ６８阳性炎症细胞增加的支持（图２Ｇ）。而ＳＥＲＣＡ２ａＡＶＶ组炎症渗出现象有所??缓解。破坏了微血管完整性和屏障功能，该结果与ＴＵＮＥＬ测定一致。进一步用??明胶油墨检测微血管密度表明ＩＲ组中断了血流的延伸，而ＳＥＲＣＡ２ａＡＶＶ可在一??定程度上恢复微血管完整性（图２Ｈ）。这些数据均表明ＳＥＲＣＡ２ａ的过度表达有??益于心脏的收缩功能，维持微血管的完整性和随后减弱炎症分散。??Ａ?Ｓｈ？ｍ（ＷＩ）?Ｓｈａｍ（ＳＥＲＣ．＼Ａ＞Ｎ）?Ｃ?Ｓｈａｍ（ＷＴ）?Ｓｈａｍ（ＳＦ．ＲｒＡ＾）?ＩＲＩ（＾Ｔ）?ＩＲＩ（ＳＦ．ＲｒＡ？＾??

【参考文献】：
期刊论文
[1]Recent advances in the diagnosis and treatment of acute myocardial infarction[J]. Koushik Reddy,Asma Khaliq,Robert J Henning.  World Journal of Cardiology. 2015(05)



本文编号：3104481