TRPC6通道在动脉粥样硬化中的作用及机制研究
发布时间：2021-04-13 01:47
背景:动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）是以血管内皮下脂质沉积和斑块形成为主要特征的血管慢性炎症性疾病。以AS为主要病理基础的冠心病、心肌梗死和脑卒中等心脑血管疾病一直是人类健康的首要威胁。深入研究AS病理机制,寻找AS潜在防治靶点仍是相关医学研究领域的重要任务。TRPC6是经典瞬时受体电位通道家族中的重要成员之一,研究表明TRPC6参与了心肌肥厚、心衰等多种心血管疾病的发病过程,而TRPC6在AS中的作用尚无文献报道。目的:本课题拟以AS患者斑块中TRPC6的表达研究为基础,进而建立高脂饲料诱导的ApoE-/-小鼠AS模型,并采用基因干预的策略,繁育Trpc6和ApoE双基因敲除小鼠,从整体、组织、细胞和分子水平深入研究TRPC6在AS病理过程中发挥的作用,并进一步阐释TRPC6对AS过程中巨噬细胞的泡沫化、炎症、极化、增殖和凋亡等重要功能的调控,为深入认识AS的病理机制和寻找AS防治新靶点提供实验依据。方法:1)尸检中取人颈动脉AS病变组织,免疫组化染色法检测人AS斑块中TRPC6蛋白表达水平;8周龄雄性ApoE-/-小...
【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TRPC6在人颈动脉AS斑块中表达显著上调
图 2. ApoE-/-小鼠经 12 周高脂饲料诱导后，在主动脉窦和大体主动脉形成明显的动脉粥样硬化斑块。8 周龄雄性 ApoE-/-小鼠高脂饲料喂养 12 周，同周龄野生型 C57BL/6小鼠正常饲料喂养作为对照。（A）主动脉窦冰冻切片 H&E 和油红 O 染色图，标尺：200 μm；（B）主动脉大体油红 O 染色图。Fig 2. ApoE-/-mice fed with high-fat diet for 12 weeks develop obvious atherosclerotiplaques in aortic sinus and aorta. Eight weeks old ApoE-/-mice were fed with high-fadiet and C57BL/6J mice (WT) were fed with normal diet for 12 weeks. (A) Aortic sinusections were stained with H&E or Oil Red O. Scale bar: 200 μm. (B) En face aortas werstained with Oil Red O.3.3 TRPC6 在小鼠主动脉 AS 斑块中表达升高在成功建立小鼠 AS 模型的基础上，我们使用 IHC 法检测了 TRPC6 在小鼠 A斑块中的表达情况。小鼠主动脉窦冰冻切片 IHC 染色结果（Fig 3A）显示，对照组
图 3. TRPC6 在高脂饲料喂养的 ApoE-/-小鼠主动脉窦 AS 斑块中表达显著上调。AS模型小鼠主动脉窦冰冻切片进行 TRPC6 的免疫组织化学染色。（A）血管免疫组化染色图，标尺：200 μm；（B）阳性染色区域平均光密度值。n=5，**P<0.01。Fig 3. Expression of TRPC6 is significantly upregulated in the atherosclerotic plaqueof ApoE-/-mice fed with HFD. Frozen sections of AS mouse aortic sinus were stained byimmunehistochemistry with TRPC6 antibody. (A) Representative IHC stained sections.Scale bar: 200 μm. (B) Mean density analysis of positive stained areas. n=5, **P<0.01.3.4 TRPC6 在 AS 斑块中的巨噬细胞上表达升高最为显著AS 斑块中包含了多种细胞成分，其中巨噬细胞、平滑肌细胞和内皮细胞在 AS病变过程中发挥重要作用。为了明确 AS 斑块中 TRPC6 的表达上调主要涉及何种细胞类型，我们使用免疫荧光双染技术检测了 TRPC6 与 3 种细胞标记物的共定位情况。TRPC6 蛋白用绿色荧光二抗指示，巨噬细胞标记物 CD68、平滑肌细胞标记物 α-SMA
本文编号：3134385
【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TRPC6在人颈动脉AS斑块中表达显著上调
图 2. ApoE-/-小鼠经 12 周高脂饲料诱导后，在主动脉窦和大体主动脉形成明显的动脉粥样硬化斑块。8 周龄雄性 ApoE-/-小鼠高脂饲料喂养 12 周，同周龄野生型 C57BL/6小鼠正常饲料喂养作为对照。（A）主动脉窦冰冻切片 H&E 和油红 O 染色图，标尺：200 μm；（B）主动脉大体油红 O 染色图。Fig 2. ApoE-/-mice fed with high-fat diet for 12 weeks develop obvious atherosclerotiplaques in aortic sinus and aorta. Eight weeks old ApoE-/-mice were fed with high-fadiet and C57BL/6J mice (WT) were fed with normal diet for 12 weeks. (A) Aortic sinusections were stained with H&E or Oil Red O. Scale bar: 200 μm. (B) En face aortas werstained with Oil Red O.3.3 TRPC6 在小鼠主动脉 AS 斑块中表达升高在成功建立小鼠 AS 模型的基础上，我们使用 IHC 法检测了 TRPC6 在小鼠 A斑块中的表达情况。小鼠主动脉窦冰冻切片 IHC 染色结果（Fig 3A）显示，对照组
图 3. TRPC6 在高脂饲料喂养的 ApoE-/-小鼠主动脉窦 AS 斑块中表达显著上调。AS模型小鼠主动脉窦冰冻切片进行 TRPC6 的免疫组织化学染色。（A）血管免疫组化染色图，标尺：200 μm；（B）阳性染色区域平均光密度值。n=5，**P<0.01。Fig 3. Expression of TRPC6 is significantly upregulated in the atherosclerotic plaqueof ApoE-/-mice fed with HFD. Frozen sections of AS mouse aortic sinus were stained byimmunehistochemistry with TRPC6 antibody. (A) Representative IHC stained sections.Scale bar: 200 μm. (B) Mean density analysis of positive stained areas. n=5, **P<0.01.3.4 TRPC6 在 AS 斑块中的巨噬细胞上表达升高最为显著AS 斑块中包含了多种细胞成分，其中巨噬细胞、平滑肌细胞和内皮细胞在 AS病变过程中发挥重要作用。为了明确 AS 斑块中 TRPC6 的表达上调主要涉及何种细胞类型，我们使用免疫荧光双染技术检测了 TRPC6 与 3 种细胞标记物的共定位情况。TRPC6 蛋白用绿色荧光二抗指示，巨噬细胞标记物 CD68、平滑肌细胞标记物 α-SMA
本文编号：3134385
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/xxg/3134385.html
最近更新
教材专著
