肥厚心肌细胞来源外泌体miR-29a调控内皮细胞血管新生机制的研究
发布时间:2021-04-14 09:10
研究背景:心肌微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelial cells,CMECs)在调节和维持心脏功能中起着重要的作用。压力超负荷时,心肌细胞发生肥大,间质成分沉积增多,导致心脏发生肥厚,而在肥厚的心肌组织中,微血管含量相对不足,这就导致了这些组织的相对缺血、缺氧,病情持续进展就会导致心力衰竭。研究发现,有许多生物活性物质及调节途径在改善心肌局部微环境中发挥着重要的作用,而外泌体(exosome)介导的细胞旁分泌效应在近年来的研究中备受关注,外泌体也被视作心肌修复及微血管再生的关键调节器。Exosome中包装了许多生物活性物质,蛋白质、脂质、多糖、细胞代谢产物以及mRNA、miRNA和核糖体RNA等,其中miRNAs是一种高度保守的非编码RNA,在近些年的研究中越来越被重视。相关研究表明,外泌体参与了心脏肥大的过程,它将miRNA转移到相邻细胞,在细胞相互之间的通讯中发挥重要作用。我们实验小组前期的研究发现,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)预处理的心肌细胞,其释放的exosome可通过传递高表达的miR-29a加重横向主动脉缩窄术后小鼠心肌肥厚,减少肥厚...
【文章来源】:遵义医科大学贵州省
【文章页数】:110 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
体外培养的原代CMs
IF鉴定CMs标志物cTnT的表达
遵义医科大学硕士学位论文李光召442.2.1将罗丹明标记的鬼笔环肽分别加入Nor组及AngⅡ处理组心肌细胞中,荧光显微镜下观察细胞形态。通过imageJ软件分析:与Nor组相比,AngⅡ-exo处理组心肌细胞表面积明显增大(P<0.05)。(图3)图3:荧光显微镜下观察鬼笔环肽标记后细胞大小(×400倍,标尺=20μm),*P<0.05与Nor组相比。2.2.2WesternBlot检测不同浓度AngⅡ对心肌细胞的影响为摸索不同浓度AngⅡ对诱导心肌细胞肥大影响,将细胞分为4组:①Nor组,②AngⅡ×10-7mmol/L处理组,③AngⅡ×10-6mmol/L处理组,④AngⅡ×10-5mmol/L处理组;WesternBlot检测ANP、BNP、Myh6、Myh7等的表达量。WesternBlot结果显示:随着浓度增加,心衰蛋白ANP、BNP、Myh7表达量逐渐增加(P<0.05),但10-6mmol/L与10-5mmol/L浓度处理下无明显差异(P>0.05),Myh6呈现出相反趋势(图4)。故后续实验选取AngⅡ×10-6mmol/L,即1umol/L为处理浓度。
【参考文献】:
期刊论文
[1]MicroRNA 21与冠心病相关性的研究进展[J]. 张倩,宋林声,赵新湘. 心血管病学进展. 2018(04)
本文编号:3137064
【文章来源】:遵义医科大学贵州省
【文章页数】:110 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
体外培养的原代CMs
IF鉴定CMs标志物cTnT的表达
遵义医科大学硕士学位论文李光召442.2.1将罗丹明标记的鬼笔环肽分别加入Nor组及AngⅡ处理组心肌细胞中,荧光显微镜下观察细胞形态。通过imageJ软件分析:与Nor组相比,AngⅡ-exo处理组心肌细胞表面积明显增大(P<0.05)。(图3)图3:荧光显微镜下观察鬼笔环肽标记后细胞大小(×400倍,标尺=20μm),*P<0.05与Nor组相比。2.2.2WesternBlot检测不同浓度AngⅡ对心肌细胞的影响为摸索不同浓度AngⅡ对诱导心肌细胞肥大影响,将细胞分为4组:①Nor组,②AngⅡ×10-7mmol/L处理组,③AngⅡ×10-6mmol/L处理组,④AngⅡ×10-5mmol/L处理组;WesternBlot检测ANP、BNP、Myh6、Myh7等的表达量。WesternBlot结果显示:随着浓度增加,心衰蛋白ANP、BNP、Myh7表达量逐渐增加(P<0.05),但10-6mmol/L与10-5mmol/L浓度处理下无明显差异(P>0.05),Myh6呈现出相反趋势(图4)。故后续实验选取AngⅡ×10-6mmol/L,即1umol/L为处理浓度。
【参考文献】:
期刊论文
[1]MicroRNA 21与冠心病相关性的研究进展[J]. 张倩,宋林声,赵新湘. 心血管病学进展. 2018(04)
本文编号:3137064
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