瑞芬太尼通过纠正锌稳态失衡保护缺血/再灌注心脏

发布时间：2021-05-06 11:56

　　第一部分瑞芬太尼通过纠正锌稳态失衡而发挥其抗心肌缺血/再灌注损伤作用目的尽管已有研究证实锌稳态失衡与心肌缺血/再灌注损伤密切相关,但是关于锌转运蛋白表达如何影响锌稳态失衡以及其在心肌缺血/再灌注损伤中的具体作用尚不清楚。瑞芬太尼（Remifentanil）己被证实可减轻心肌缺血/再灌注损伤,但其相应分子机制尚未完全阐明。本部分的研究目的是证明瑞芬太尼能否通过纠正锌稳态失衡发挥其抗心肌缺血/再灌注损伤的作用。方法利用Langendorff模型建立离体大鼠局部心脏缺血/再灌注模型,缺血时间为30min,再灌注时间为2h。瑞芬太尼于缺血前30min给予,5 min/次,每次间隔5min,共3个循环。通过伊文氏蓝+TTC染色法测定心肌梗死面积;用电感耦合等离子体发射光谱仪检测心脏锌离子含量;用Western blotting法测定心肌危险区金属应答转录因子1（Metal responsive factor 1,MTF1）及锌转运蛋白1（Zinc transporter l,ZnT1）的表达。利用H9c2细胞建立缺氧/复氧模型,瑞芬太尼于缺氧前2 h预先给药。采用CCK8法测定各组细胞存活率,利... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：120 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、瑞芬太尼通过纠正锌稳态失衡而发挥其抗心肌缺血/再灌注损伤作用
    1.1 对象和方法
        1.1.1 研究对象
        1.1.2 实验仪器
        1.1.3 常用试剂
        1.1.4 关键试剂及试剂盒
        1.1.5 大鼠离体心脏灌流及心肌缺血/再灌注模型
        1.1.6 心功能测定
        1.1.7 心肌梗死面积测定
        1.1.8 电感耦合等离子体发射光谱仪检测心脏锌离子量
        1.1.9 H9c2细胞的复苏、传代和冻存
        1.1.10 细胞计数
        1.1.11 建立H9c2细胞缺氧/复氧模型
        1.1.12 CCK8 法检测细胞存活率
        1.1.13 Newport Green DCF检测细胞内锌离子含量
        1.1.14 Western blotting
        1.1.15 质粒构建及转染
        1.1.16 统计学分析
    1.2 结果
        1.2.1 不同浓度瑞芬太尼预处理减轻心肌缺血/再灌注损伤
        1.2.2 瑞芬太尼预处理纠正再灌注后心肌细胞锌稳态的失衡
        1.2.3 瑞芬太尼预处理通过抑制MTF1和ZnT1表达而纠正心肌细胞锌稳态的失衡
    1.3 讨论
    1.4 小结
二、瑞芬太尼通过抑制锌离子丢失所致内质网应激而减轻心肌线粒体损伤
    2.1 对象和方法
        2.1.1 研究对象
        2.1.2 实验仪器
        2.1.3 新增试剂
        2.1.4 动物实验方案
        2.1.5 细胞实验方案
        2.1.6 用ER Tracker Red及Newport Green DCF共染法测定内质网锌离子含量变化
        2.1.7 DCFH-DA检测活性氧含量
        2.1.8 Mitosox Red荧光探针检测线粒体内超氧化物水平
        2.1.9 JC-1染色检测细胞线粒体膜电位变化
        2.1.10 统计学分析
    2.2 结果
        2.2.1 瑞芬太尼通过减少锌离子外流抑制心肌细胞内质网应激
        2.2.2 生理条件下锌离子丢失介导内质网应激及细胞凋亡
        2.2.3 锌离子通过减轻内质网应激介导瑞芬太尼对再灌注心肌的保护作用
        2.2.4 瑞芬太尼通过锌离子减轻内质网应激进而防止线粒体损伤
    2.3 讨论
    2.4 小结
全文结论
论文创新点
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
附录
综述 锌与细胞信号转导
    综述参考文献
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]《中国心血管病报告2017》概要[J]. 陈伟伟,高润霖,刘力生,朱曼璐,王文,王拥军,吴兆苏,李惠君,顾东风,杨跃进,郑哲,蒋立新,胡盛寿.  中国循环杂志. 2018(01)



本文编号：3171880