TEAD1靶向作用Pitx2c和Myocardin调控胚胎心血管发育的机制研究

发布时间：2021-05-31 14:41

　　研究背景与研究目的:心脏是哺乳动物发育过程中第一个形成的器官,血管发生及血管生成是心血管发育过程中的关键步骤,血液及营养物质通过心血管系统泵送全身组织,对胚胎发育极为重要。心肌细胞（Cardiomyocytes,CMCs）、血管平滑肌细胞（Vascular smooth muscle cells,VSMCs）是心血管系统的主要组成成分,CMCs和VSMCs的增殖、分化受损将导致多种心血管疾病的发生。TEAD1 与CMCs、VSMCs基因的MCAT元件结合,在血清应答因子SRF、Myocardin等协同作用下,调控MCAT元件依赖性肌特异性基因的表达。Pitx2是介导心血管左右不对称发育的关键信号分子,Pitx2c与Myocardin在CMCs、VSMCs分化过程中起着重要作用。然而,Pitx2c和Myocardin的调节表达机制,及Pitx2c和Myocardin在调节平滑肌特异性基因表达中的功能关系仍不清楚。TEAD1对血管发育的影响及TEAD1与Pitx2c之间调控作用关系的文章未见报道。本文以SM22a-Cre为启动子,在CMCs、VSMCs特异性敲除TEAD1基因,揭示TEAD... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：118 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

小鼠胚胎基因型鉴定及敲除TEAD1验证

挚杉?鲅?谋洌欢??FF、FW 及 Het 组胚胎发育正常（图1.2 A、B、C）。这提示我们 TEAD1 对于胚胎的正常发育不可或缺、TEAD1 基因缺失将导致胚胎死亡，但半剂量的 TEAD1 基因（Het 组）可维持胚胎的正常发育。我们对本实验所有杂交繁殖所得的胚胎进行统计，得到每种基因型的胚胎分布如下表，在 E14.5 后，未能检测到 KO 基因型胚胎。

体动物实验部分：心血管系统特异性敲除 TEAD1 基因对胚光显微镜下观察 GFP 表达情况。结果显示在 Het 组细胞发绿色荧光，而心脏外皮、内皮细胞及其他组织性组织，这表明 SM22a 有效的启动了 Cre 酶的表达（1 敲除后对心脏发育的影响，取 E12.5 及 E13.5 的石E 染色。我们发现与对照组相比，E12.5、E13.5 的 K肌小梁发育不良，CMCs 数量减少，但对于 TEAD1影响（图 B、C）。通过对 E12.5、E13.5 心脏左室、组室壁厚度显著减少（图 D，对照组 N=4，KO 组 N=鼠心脏发育在 E14.5 室间隔膜部发育完全、左右心室1 后的 E14.5 期，我们观察到室间隔缺损及右室双流E），这提示我们 TEAD1 基因表达缺陷与先天性心脏，TEAD1 基因突变或参与了人类先天性心脏病的发临床预防、筛查诊断先天性心脏病的新靶点。


本文编号：3208447