同型半胱氨酸通过调节IL-6/STAT3信号通路促进缺血的H9c2细胞系凋亡

发布时间：2021-06-08 11:25

　　背景:心肌梗死（Myocardial Infarction,MI）是一种严重威胁我们生命的缺血性心脏病,大量研究证明炎症反应诱导细胞坏死、自噬和/或凋亡为其可能的发病机制之一。IL-6/STAT3信号通路作为一条重要的炎症反应通路,STAT3表达的变化在心肌梗死中的作用尚存在争议。高同型半胱氨酸（Homocysteine,Hcy）是心脑血管疾病的危险因素之一,高同型半胱氨酸与IL-6/STAT3信号通路、心肌缺血的影响还未有相关报道。目的:本研究主要探讨缺血环境下Hcy对H9c2细胞系P-STAT3、Caspase-3及IL-6表达的影响,以及对细胞形态的影响。方法:本实验将H9c2细胞系培养于含0%FBS培养基中,在其对数生长期时加入不同浓度Hcy作用不同时间,通过蛋白免疫印迹法（Western Blot）、免疫荧光染色法等方法检测各组P-STAT3、Caspase-3的表达情况。然后同时加入雷洛昔芬（Raloxifene）和Hcy处理,并用qRT-PCR及上述同样的方法检测各组P-STAT3、Caspase-3以及IL-6的表达情况。结果:Western Blot结果显示:1.0%... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

炎症因子在ACS中的机制图

华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文5.结果5.1 Hcy 诱导缺血的 H9c2 细胞系 P-STAT3、Caspase-3 表达增加，且与作用时间相在含 0%FBS 的培养基（模拟缺血条件）内培养 H9c2 细胞系，然后加入 6mM H诱导一定时间（0、1、2、4、6、8h）后，分别收集细胞蛋白，采用 Western Blot 检P-STAT3 和 Caspase-3 的表达情况。Western Blot 结果如图所示（图 3）。随着 Hcy 作用时间延长，P-STAT3 的表达逐渐增加，于 6h 时表达最强，但 8h 表达较前下降。随着 Hcy 作用时间延长，Caspase-3 的表达随时间延长而逐渐增加6h 时表达明显增加，但 8h 时并无明显改变。

5.3 雷洛昔芬（Raloxifene）可抑制 Hcy 诱导的缺血 H9c2 细胞系 P-STAT3 和 Caspase-3的高表达在含 0%FBS 的培养基（模拟缺血条件）内培养 H9c2 细胞系，将细胞分为四组：1）Control 组；2）Hcy 组：6mM Hcy 单独作用 6h；3）Raloxifene 组：6.25mM Raloxifene单独作用 6h；4）Hcy+Raloxifene 组：6.25mM Raloxifene 及 6mM Hcy 共同作用 6h。处理完毕后分别收集细胞蛋白，采用 Western Blot 检测各组 P-STAT3 和 Caspase-3 的表达情况。Western Blot 结果如图所示（图 5）。


本文编号：3218344