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Fgf23表达影响小鼠DVT形成的研究

发布时间:2021-06-09 01:43
  深静脉血栓形成(DVT)指血液在静脉内异常凝结,致使部分或完全阻塞官腔,造成重要器官栓塞,严重时威胁生命。DVT受多因素和复杂机制调控,涉及内皮细胞、血小板、白细胞三者之间的相互作用,它们的形态、功能变化,维持着局部静脉内皮微环境的动态平衡,决定着微环境是否向有利于血栓形成的方向发展,对凝血级联反应的触发起关键作用。然而,对疾病进展的分子病理生理学和机制仍知之甚少。Fgf23是一种骨源性磷尿激素,可能成为识别DVT患者的有用生物标志物,其与心血管、炎症和免疫相关。我们通过统计、动物组织实验和生物信息学进行多维数据分析。在研究样本中,D组(n=3)静脉内皮样本中的Fgf23表达较C组(n=3)有明显降低,血栓湿重及长度也都明显降低,其差异有统计学意义(P<0.05)。通过对Fgf23的研究,可能会对DVT的病理生理学产生新的生物学见解。并完善我们目前对DVT的理解和患者的管理。[目 的]1、小鼠Fgf23的表达是否对深静脉血栓的形成有影响。2、在小鼠上Klf15是否调控Fgf23基因的表达。3、Klf15是否通过影响Fgf23的表达进而调控DVT的形成。[方 法]实验一:狭窄法构建... 

【文章来源】:昆明医科大学云南省

【文章页数】:61 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

Fgf23表达影响小鼠DVT形成的研究


图4鼠下腔静脉内皮细胞Fgf23的表达变化??ur.Eron?onuseneor?vnava?ences??

血栓,长度,纯合子,基因敲除


weigh??vveight/length??20-.?I—^??e?h^H??I15'?—麵?r°"?_?_u.??*?:lIL?111?i??,女?/?/?,#?/,??</??图5.组小鼠血栓湿重、湿重长度比??Figure?5.?Wet?weight?and?wet?weight/length?of?mice?thrombus??实验二:狭窄法构建Kin?5基因敲除C57BL/6纯合子小鼠深静脉血栓形成??模型,利用rcaHimc-PCR、qPCR检测下游Fgf23表达变化。??材料和方法??本课题组前期研宂发现,在小鼠DVT梭型屮千扰Klfl5表达后,静脉内皮??细胞Kll'15表达明W.卜'降,相关分子如Ankrdl、Fgf23、丨L-1P、Mmp-9等表达??随之变化,而血栓形成叫显增加,提示KU'15?h『能迎过调控下游蕋因的农达来调??拧血柃的形成。木实验将继续在在动物实验中,通过静脉注射Fgf23-siRNA?|????扰Klfl5基函敲除C57BL/6纯合子小鼠中的Fgf23基因表达,采用real-time-PCR、??qPCR检测卜'游Fgf23农达免化。??1、实验材料??1.1实验动物选娶饲养??昆叨医科大学SPF级实验动物房购买KH'15基因敲除C57BL/6纯合子小鼠??(C57BL/6-Klfl5-/-)?12?只,C57BL/6?野生型小鼠?3?只,共?15?只,SPF?饲养,??分4笼,纯合子每笼4只,野生型每笼3只;体重17-20克,雌雄不限,随机分??组,予以灭菌瓜子及标准饲料混合饲养,饲养小鼠房间要求恒溫22?26°C,湿??33??

内皮,静脉,血栓,细胞


NA-KO-2?11?19.42?25.?14?2.?9632156??Fgf23-siRNA-KO-3?12?18.?53?26.92?4.?5321549??DVT-WT-1?13?18.74?24.?58?5.?2163253??DVT-WT-2?14?19.78?24.11?6.?2153654??DVT-WT-3?15?19.29?25.?95?6.2513659??10-.?*?1??S)?8-?T?丁??Hi.??C^°??图7.小鼠下腔静脉内皮细胞Fgf23的表达变化??Figure?7.pression?of?Fgf23?in?mice?inferior?vena?cava?endothelial?cells??4小鼠血栓湿重、长度、湿重长度比??将所有分组内全部小鼠用颈椎脱臼法处死后,分离小鼠下腔静脉成栓段血??管,仔细分离血栓并编号计数;用精密电子天秤称重、电子游标卡尺测量长度。??各组小鼠血栓湿重、长度、湿重/长度均采用单因素方差分析,两两进行组间比??较。A组小鼠未经造模,均未成栓。B组、C组、D组、E组血栓湿重分别为??17.?80±3.80、18.?52±4.?13、4.?72土?1.81、14.?80±3.?80。D?组与?C?组血栓湿重??40??


本文编号:3219653

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