MiR-27a/b靶向沉默ABCA1对巨噬细胞胆固醇流出的影响
发布时间：2021-06-13 19:44
目的：研究显示miR-27a/b参与调控动脉粥样硬化（atherosclerosis, As）发生发展的众多危险因素，其在As中的可能机制已由我们进行文献归纳整理，并发表在《Atherosclerosis》，基于本研究团队的工作，我们提出miR-27a/b通过调控影响胆固醇流出的关键蛋白ABCA1参与影响As的发生发展。因此，本论文拟探讨miR-27a/b对ABCA1的表达及其介导的胆固醇流出的影响。方法：运用生物信息学的方法对miR-27a和miR-27b序列的保守性、区别、存在区域进行分析，并重点分析miR-27a/b与ABCA1的结合情况（包括保守性、结合位点、得分、结合自由能、结合碱基特征等）；双荧光素酶报告基因检测miR-27a/b与ABCA1的结合情况；转染miR-27a/b mimics或inhibitor，采用qPCR和Western blot检测人THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞、小鼠RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞、人HepG2细胞中ABCA1mRNA和蛋白表达情况；采用H3标记的胆固醇孵育的方法，运用液体闪烁计数器（liquid scintillation co...
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
胆固醇和脂肪酸代谢示意图
蛋白等）[13,14]，将 pri-miRNA 加工成长约 70-100nt 具有茎环结构的—pre-miRNA，然后在转运蛋白 Exportin-5 帮助下经 Ran-GTP-depen胞浆[14,15]。在细胞浆中，pre-miRNA 经同属 RNase III 家族的 Dicer 家族的 Ago2 调节蛋白加工修饰，形成长约 22nt 的 microRNA RNA:miRNA*），Dicer 和 Ago2 继续将双链体剪切成成熟的单链（guidiRNA）和互补链（passenger strand 或 microRNA*）。两条链的去向有iRNA 与 Ago 蛋白家族及 GW182/ TNRC6 等其它众多蛋白组结合形成的核糖核蛋白沉默复合体(RNA-induced silencing complex, RISC)，m因动力学不稳定，可能由核酸酶或Aog2本身的剪切活性所降解[14-16]（
Fig.3 miR-33 regulate lipid metabolism图 3 miR-33 调控脂质代谢示意图：胆固醇酯，FC：游离胆固醇，apoA-I：载脂蛋白 A-I，HDL：高密度脂蛋白，C1：C 型 1 类尼曼-匹克蛋白，ABCA1：三磷酸腺苷结合盒转运体 A1，ABCG1：酸腺苷结合盒转运体 G1，RIP140：受体相互作用蛋白 140. AMPK: 磷酸腺AMP）激活的蛋白激酶.CROT：肉碱 O 辛基转移酶，HAHDB：羟烷基辅酶氢酶，CPT1A：肉毒碱棕榈酰转移酶 I，Exon：外显子，SREBPF 是 SREBP码基因。miR-33 的另一个亚基 miR-33b，与 miR-33a 高度同源，在种子区域外仅有两苷酸不同，两者有许多重叠交错的靶基因，如 ABCA1、ABCG1 等，提示-33b 在胆固醇稳态、脂肪酸氧化、甘油三酯合成方面也发挥重要作用，但低
【参考文献】：
期刊论文
[1]脂蛋白酯酶研究进展及对动脉粥样硬化的影响[J]. 田国平,陈五军,何平平,尹卫东,唐朝克. 生理科学进展. 2012(05)
[2]以ABCA1为靶点防治动脉粥样硬化[J]. 唐朝克. 中国动脉硬化杂志. 2011(11)
[3]microRNAs——脂质代谢调控新机制[J]. 陈五军,尹凯,赵国军,唐朝克. 生物化学与生物物理进展. 2011(09)
[4]亚毒性剂量毒死蜱降低新西兰兔ABCA1表达加重高脂诱导的动脉粥样硬化[J]. 周寿红,杨旭红,宋涛,吴树金,黄宁江,刘立英. 生物化学与生物物理进展. 2011(01)
[5]MicroRNA,lncRNA与神经退行性疾病[J]. 黄文涛,郭向前,戴甲培,陈润生. 生物化学与生物物理进展. 2010(08)
[6]三磷酸腺苷结合盒转运体G1的研究进展[J]. 刘协红,唐朝克. 生理科学进展. 2009(03)
[7]ABCA1与NPC1在细胞内胆固醇转运中的作用[J]. 李晓旭,唐朝克. 生命的化学. 2008(05)
[8]肝X受体激动剂通过上调NPC1基因的表达减轻apoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变程度[J]. 欧翔,代小艳,龙治峰,唐雅玲,曹冬黎,郝新瑞,胡炎伟,李晓旭,唐朝克. 中国科学（C辑:生命科学）. 2008(04)
[9]三磷酸腺苷结合盒转运体A1研究的最新进展[J]. 胡炎伟,唐朝克. 生物化学与生物物理进展. 2008(04)
[10]过氧化体增殖物激活型受体γ和δ在高密度脂蛋白介导细胞胆固醇流出中的作用[J]. 易光辉,杨永宗,唐朝克,米五平,王燕,危当恒. 中国动脉硬化杂志. 2003(04)
硕士论文
[1]miR-27b通过靶向于PPARγ触发脂肪细胞分化[D]. 吴宗松.西北农林科技大学 2009
本文编号：3228203
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
胆固醇和脂肪酸代谢示意图
蛋白等）[13,14]，将 pri-miRNA 加工成长约 70-100nt 具有茎环结构的—pre-miRNA，然后在转运蛋白 Exportin-5 帮助下经 Ran-GTP-depen胞浆[14,15]。在细胞浆中，pre-miRNA 经同属 RNase III 家族的 Dicer 家族的 Ago2 调节蛋白加工修饰，形成长约 22nt 的 microRNA RNA:miRNA*），Dicer 和 Ago2 继续将双链体剪切成成熟的单链（guidiRNA）和互补链（passenger strand 或 microRNA*）。两条链的去向有iRNA 与 Ago 蛋白家族及 GW182/ TNRC6 等其它众多蛋白组结合形成的核糖核蛋白沉默复合体(RNA-induced silencing complex, RISC)，m因动力学不稳定，可能由核酸酶或Aog2本身的剪切活性所降解[14-16]（
Fig.3 miR-33 regulate lipid metabolism图 3 miR-33 调控脂质代谢示意图：胆固醇酯，FC：游离胆固醇，apoA-I：载脂蛋白 A-I，HDL：高密度脂蛋白，C1：C 型 1 类尼曼-匹克蛋白，ABCA1：三磷酸腺苷结合盒转运体 A1，ABCG1：酸腺苷结合盒转运体 G1，RIP140：受体相互作用蛋白 140. AMPK: 磷酸腺AMP）激活的蛋白激酶.CROT：肉碱 O 辛基转移酶，HAHDB：羟烷基辅酶氢酶，CPT1A：肉毒碱棕榈酰转移酶 I，Exon：外显子，SREBPF 是 SREBP码基因。miR-33 的另一个亚基 miR-33b，与 miR-33a 高度同源，在种子区域外仅有两苷酸不同，两者有许多重叠交错的靶基因，如 ABCA1、ABCG1 等，提示-33b 在胆固醇稳态、脂肪酸氧化、甘油三酯合成方面也发挥重要作用，但低
【参考文献】：
期刊论文
[1]脂蛋白酯酶研究进展及对动脉粥样硬化的影响[J]. 田国平,陈五军,何平平,尹卫东,唐朝克. 生理科学进展. 2012(05)
[2]以ABCA1为靶点防治动脉粥样硬化[J]. 唐朝克. 中国动脉硬化杂志. 2011(11)
[3]microRNAs——脂质代谢调控新机制[J]. 陈五军,尹凯,赵国军,唐朝克. 生物化学与生物物理进展. 2011(09)
[4]亚毒性剂量毒死蜱降低新西兰兔ABCA1表达加重高脂诱导的动脉粥样硬化[J]. 周寿红,杨旭红,宋涛,吴树金,黄宁江,刘立英. 生物化学与生物物理进展. 2011(01)
[5]MicroRNA,lncRNA与神经退行性疾病[J]. 黄文涛,郭向前,戴甲培,陈润生. 生物化学与生物物理进展. 2010(08)
[6]三磷酸腺苷结合盒转运体G1的研究进展[J]. 刘协红,唐朝克. 生理科学进展. 2009(03)
[7]ABCA1与NPC1在细胞内胆固醇转运中的作用[J]. 李晓旭,唐朝克. 生命的化学. 2008(05)
[8]肝X受体激动剂通过上调NPC1基因的表达减轻apoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变程度[J]. 欧翔,代小艳,龙治峰,唐雅玲,曹冬黎,郝新瑞,胡炎伟,李晓旭,唐朝克. 中国科学（C辑:生命科学）. 2008(04)
[9]三磷酸腺苷结合盒转运体A1研究的最新进展[J]. 胡炎伟,唐朝克. 生物化学与生物物理进展. 2008(04)
[10]过氧化体增殖物激活型受体γ和δ在高密度脂蛋白介导细胞胆固醇流出中的作用[J]. 易光辉,杨永宗,唐朝克,米五平,王燕,危当恒. 中国动脉硬化杂志. 2003(04)
硕士论文
[1]miR-27b通过靶向于PPARγ触发脂肪细胞分化[D]. 吴宗松.西北农林科技大学 2009
本文编号：3228203
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/xxg/3228203.html
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