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心肌细胞特异性高表达寡酶素敏感相关蛋白对压力超负荷下心肌肥厚的保护作用研究

发布时间:2021-06-15 21:26
  目的:探讨OSCP蛋白高表达对TAC诱导病理性心肌肥厚的影响及作用机制。方法:构建主动脉弓收窄术(TAC)诱导心肌肥厚小鼠模型,术后三天经尾静脉注射AAV9-cTNT-OSCP/GFP病毒,4周以后做给小鼠做超声,免疫印迹和实时定量PCR分析检测OSCP表达量的变化,采用HE染色、masson染色、天狼星红染色检测组织水平上心肌肥厚程度和纤维化程度。采用OROBOROSOxygraph-2k高分辨率的呼吸测定仪检测各组线粒体氧化呼吸活性。结果:1.免疫印迹和实时定量PCR分析结果显示,与正常对照组相比,TAC小鼠心肌组织中OSCP表达量明显降低。2.心肌细胞特异性高表达OSCP可以改善心肌肥厚和纤维化:TAC术后超声结果显示主动脉弓缩窄术注射AAV9-cTNT-GFP病毒组小鼠心脏收缩功能指标心脏射血分数和左心室缩短分数相比主动脉弓缩窄术注射AAV9-cTNT-OSCP病毒组明显下降,而舒张期和收缩期的左心室内径、舒张期和收缩期的左心室容积与主动脉弓缩窄术注射AAV9-cTNT-OSCP病毒组相比均增大。四组小鼠TAC术后心重/体重、心重/胫骨长均较假手术组升高,但与给与GFP对照病毒... 

【文章来源】:华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:56 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

心肌细胞特异性高表达寡酶素敏感相关蛋白对压力超负荷下心肌肥厚的保护作用研究


动物模型设计

心功能不全,主动脉缩窄,小鼠


2.实验结果2.1 TAC 诱导小鼠心肌肥厚为了确定 TAC 诱导心肌肥厚模型的建立,通过 TAC 术后 4 周做超声、组织学检查以及检测心衰标记因子 ANP 等。随机将小鼠分为假手术、TAC 手术两组4 周后超声结果显示,与假手术组相比, TAC 组小鼠 EF%下降到 40%左右,FS%下降到 20%-30%(图 2A、B、C)。充分说明 TAC 术后 4 周小鼠心功能不全。

心肌纤维化,主动脉缩窄,心肌细胞,组织学检查


包埋进行组织学检查,分别采用 HE 染色、masson 染色、天狼星红染色。与ham 小鼠相比, TAC 4 周后 HE 染色显示心肌细胞明显增大,masson 染色、天星红染色均可见血管周围和心肌细胞明显纤维化(图 3)。综上所述我们可以定 TAC 术后 4 周小鼠心肌肥厚心衰模型建立成功。


本文编号:3231794

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