冠心病患者循环miR-21、miR-100、miR-423-5p的表达及其与左室重塑的关系研究

发布时间：2021-07-09 14:07

　　研究背景冠心病（CAD）严重威胁着人类健康，发病呈上升趋势。冠心病是导致心衰的的主要原因[1]，而心衰是各种心脏疾病的严重和终末阶段，早期正确诊断、鉴别诊断和治疗冠心病能有效减少死亡率，基于此，寻求诊断冠心病灵敏度和特异性高的标志物仍然任重道远。CAD导致心衰的主要发病机制之一为心肌病理性重塑，如心肌坏死、凋亡、肥大、自噬、心肌细胞外基质沉积、血管新生等，心脏功能渐渐恶化，发展至心衰直至患者死亡。CAD患者减少心肌纤维化、调控缺血区周边的基质沉积、增加血管新生对于防止心室重塑、改善心功能尤其重要。心脏缺血后心脏相关细胞内基因表达紊乱、调节失衡，导致相应受调节蛋白表达发生改变，可能是冠心病缺血后心脏发生心室重塑的病理基础。基于以上理论，从基因或分子水平研究心室重塑有可能为临床治疗冠心病、防止心室重塑提供新的思路。MicroRNAs（miRNAs）是一类长度为21²5个核糖核苷酸的非编码内源性小单链RNAs分子，在生物进化过程中高度保守。它们通过碱基互补或部分碱基互补与目标mRNA结合，使mRNA降解或者抑制mRNA的翻译，在转录后水平调节基因表达。MiRNAs在多种... 

【文章来源】：广州医科大学广东省

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

qRT-PCR检测microRNA的原理示意图（摘自Chen[48]

72℃ 32 秒延伸（32 秒收集荧光信号），变性-退火-延伸进行 40 个循环熔解曲线分析：温度 60℃~95℃。分析软件：7500 Software v2.0.6。在扩增目的基因 miR-21、miR-100、miR-423-5p 的同时，我们还扩增了 snRNA U6（管家基因）作为内对照。所有实时定量 PCR 实验独立重复 3 次。相对表达量采用 2-(Δt)方法[49]，将目的基因表达 CT*(Cycle threshold)值与 U6 表达 CT 值进行比较，标准化后的 CT 值为相对定量值(*注：Ct 值的含义指每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数)。标准化后的 CT 值：ΔΔCt=(Ct目的基因-Ct管家)实验组-(Ct目的基因-Ct管家基因)参照组，相对样品表达量=2-(ΔΔCt)，以相对样本表达量表示循环 miR-21、miR-100、miR-423-5p 的相对表达水平。部分样本的内参基因及目的基因的基因扩增曲线和熔解曲线见图（图 2-2 至2-9）。

部分样品的snRNAU6内参基因熔解曲线


本文编号：3273890