尿多酸肽对原代红系细胞γ-珠蛋白表达的体外研究

发布时间：2021-07-14 01:07

　　目的:探讨尿多酸肽（CDA-Ⅱ）对体外培养原代红系细胞γ-珠蛋白基因和蛋白表达的影响,为CDA-Ⅱ对β-地中海贫血的治疗提供新思路。方法:以不同浓度CDA-Ⅱ（0 mg/mL、1 mg/mL、2 mg/mL、3 mg/mL、4 mg/mL）作用原代红系细胞24 h、48 h和72 h,采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）和Cell counting kit-8（CCK-8）法分别检测γ-珠蛋白基因的表达及细胞增殖-毒性情况;以3 mg/mL CDA-Ⅱ为实验组、200 nmol/L地西他滨和100μmol/L羟基脲为阳性对照组以及等体积PBS+DMSO为阴性对照组作用细胞后,采用RT-PCR检测γ-珠蛋白、DNA甲基转移酶1（DNMT1）和FOXO3a mRNA表达的变化;Western Blot（WB）检测γ-珠蛋白表达的情况。结果:RT-PCR结果表明,3 mg/mL CDA-Ⅱ作用细胞48 h和72h后上调γ-珠蛋白基因的表达作用明显（P<0. 05）,分别为空白对照组（0 mg/mL）的2. 5倍和2. 68倍;CCK-8结果显示细胞存活率存在时间和浓度依赖性下降... 

【文章来源】：广西医科大学学报. 2020,37(04)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

流式细胞术检测原代红系细胞CD34+、CD71和CD235a的表达情况

(1)RT-PCR结果显示，与阴性对照组比较，CDA-Ⅱ组和地西他滨、羟基脲阳性对照组均能使γ-珠蛋白基因表达升高（P<0.001），分别为阴性对照组的2.2倍、2.3倍和3.1倍。其中CDA-Ⅱ组与地西他滨组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。（2)WB结果显示，与阴性对照组比较，CDA-Ⅱ组和地西他滨、羟基脲阳性对照组均能使γ-珠蛋白表达升高（P<0.01），分别为阴性对照组的2.7倍、2.5倍、3.4倍，但三组之间两两比较，差异无统计学意义（P>0.05），见图3。2.5 CDA-Ⅱ、地西他滨和羟基脲对原代红系细胞DNMT1、FOXO3a基因表达的影响

(1)RT-PCR结果显示，与阴性对照组比较，CDA-Ⅱ组和地西他滨、羟基脲阳性对照组均能够降低DNMT1基因的表达（P<0.05），其中以CDA-Ⅱ组下调DNMT1基因的表达作用最显著，为阴性对照组的0.58倍。（2)CDA-Ⅱ组和地西他滨、羟基脲阳性对照组均能够升高FOXO3a基因的表达，其中CDA-Ⅱ组和羟基脲组与阴性对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05），见图4。3 讨论

【参考文献】：
期刊论文
[1]γ-珠蛋白基因表达调控机制与临床应用[J]. 鞠君毅,赵权.  遗传. 2018(06)
[2]地中海贫血的诊断治疗近况[J]. 赖永榕.  内科急危重症杂志. 2012(06)

博士论文
[1]尿多酸肽抗骨髓增生异常综合征（MDS）作用及其机制的实验研究[D]. 黄健.浙江大学 2008



本文编号：3283092