CD137信号通过STAT6/PPARδ通路调控动脉粥样硬化中巨噬细胞M2极性转变

发布时间：2021-07-28 00:05

　　研究目的:探讨CD137信号是否通过STAT6/PPARδ通路调控动脉粥样硬化巨噬细胞M2极性转变。研究方法:（1）体内实验将6⁸周龄ApoE^-/-雄性小鼠分为5组,包括对照组、CD137激动组、CD137抑制组,STAT6抑制组和PPARδ抑制组;通过HE染色检测小鼠主动脉中动脉粥样硬化斑块的面积,通过免疫荧光染色检测小鼠主动脉斑块内巨噬细胞iNOS和Arginase-1表达量,以及STAT6和PPARδ的表达量;（2）体外实验使用诱导腹腔无菌性炎症法提取腹腔原代巨噬细胞;使用流式细胞术、western blot和ELISA验证CD137信号对巨噬细胞M2极性转变的作用;使用STAT6抑制剂抑制STAT6的表达,并使用western blot验证抑制效率;使用PPARδsiRNA干扰PPARδ的表达,并使用qRT-PCR验证干扰效率;使用流式细胞术和qRT-PCR验证STAT6/PPARδ通路对巨噬细胞极性转变的影响;（3）共培养实验上室种植巨噬细胞,下室基质胶种植内皮细胞,实验分4组,即对照组、CD137信号激动组、STAT6抑制组和PP... 

【文章来源】：江苏大学江苏省

【文章页数】：84 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

各组小鼠主动脉斑块HE染色(100μm)

江苏大学硕士学位论文12图2.2各组小鼠主动脉斑块中iNOS和Arginase-1的免疫荧光染色(100μm)Fig2.2Immunofluorescencestainingofp-STAT6andPPARδinplaquesofeachgroupmice免疫荧光染色显示小鼠主动脉粥样硬化斑块内Arginase-1(绿色，J-L)和iNOS(红色，G-I)阳性细胞的荧光。DAPI(M-O)，Merge(P-R)。定量分析显示巨噬细胞表达的Arginase-1/iNOS的荧光强度。**,P<0.01;***,P<0.001.2.3.3小鼠腹腔原代巨噬细胞鉴定细胞免疫荧光染色结果显示，几乎所有的腹腔巨噬细胞都表达CD68。流式细胞术结果显示，小鼠腹腔原代巨噬细胞分离纯度高达97.93%±1.31%，适于后续实验。图2.3小鼠腹腔巨噬细胞的免疫荧光染色(100μm)Fig2.3Immunofluorescencestainingofprimarymurineperitonealmacrophages

江苏大学硕士学位论文12图2.2各组小鼠主动脉斑块中iNOS和Arginase-1的免疫荧光染色(100μm)Fig2.2Immunofluorescencestainingofp-STAT6andPPARδinplaquesofeachgroupmice免疫荧光染色显示小鼠主动脉粥样硬化斑块内Arginase-1(绿色，J-L)和iNOS(红色，G-I)阳性细胞的荧光。DAPI(M-O)，Merge(P-R)。定量分析显示巨噬细胞表达的Arginase-1/iNOS的荧光强度。**,P<0.01;***,P<0.001.2.3.3小鼠腹腔原代巨噬细胞鉴定细胞免疫荧光染色结果显示，几乎所有的腹腔巨噬细胞都表达CD68。流式细胞术结果显示，小鼠腹腔原代巨噬细胞分离纯度高达97.93%±1.31%，适于后续实验。图2.3小鼠腹腔巨噬细胞的免疫荧光染色(100μm)Fig2.3Immunofluorescencestainingofprimarymurineperitonealmacrophages


本文编号：3306803