ZFP580调控eNOS/NO信号通路促进EPCs分化的分子机制研究

发布时间：2021-08-02 06:45

　　目的:内皮功能紊乱是心脑血管病重要的病生理基础。加速血管损伤后再内皮化和血管新生,是预防及治疗心血管病的关键。内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）参与血管内皮修复及血管新生,EPCs的归巢、增殖及分化受多种转录因子调控网络的影响,其机制尚未阐明。本实验旨在研究新型C2H2锌指蛋白基因ZFP580调控EPCs分化的分子机制,为深入研究ZFP580的生物学功能提供实验依据,为治疗血管性疾病提供新的治疗策略和靶点。方法:①密度梯度离心法,分离培养大鼠骨髓源性EPCs,免疫荧光染色及流式细胞技术（FACS）鉴定EPCs;②体外诱导培养EPCs,观察EPCs在0 d、4 d、7 d、14 d细胞形态的动态改变;免疫荧光染色检测eNOS在相应时间点的表达变化;流式细胞技术检测EPCs分化表面分子标记物的动态改变;QPCR及Western blot检测相应时间点ZFP580 mRNA和蛋白表达水平的变化;③腺病毒转染技术获得过（低）表达ZFP580的EPCs,QPCR、Western blot、流式细胞技术及体内外血管形成实验等方法检测ZFP580对EPC... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

锌指基因是人类基因组中一类重要的调控基因，锌指转录因子在细胞增殖、分化与迁移等过程中起着十分重要的作用[20]

在受到组织缺血、缺氧、血管壁损伤、动脉粥样硬化斑块、冠脉血栓、介入支架术后等刺激后，骨髓源性内皮前体细胞(Endothelial precursor cells, EPCs)可被动员并释放至外周血中，招募至血管损伤部位，发挥其生物学效应，如图1所示。内皮前体细胞即内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells, EPCs)是一类能循环、增殖并分化为血管内皮细胞，但尚未表达成熟血管内皮细胞表型，也未形成血管的前体细胞[9]。EPCs最主要的生物学功能促进血管新生，参与血管损伤后的内皮修复及再内皮化。多项研究表明高血压、冠心病患者或动物体内EPCs的数量和功能是下降的，在动物实验模型中进行EPCs移植治疗后，结果发现症状有所改善，表现为血管弹性增加、血压下降、心输出量增加[10,11]。国外另有研究证实，在颈动脉球囊损伤模型中，动员或移植EPCs可以加速损伤后血管再内皮化，减少新生内膜的过度增生[12]。此外

【参考文献】：
期刊论文
[1]ZNF580-EGFP融合蛋白的亚细胞定位研究[J]. 张文成,孙慧燕,孟祥艳.  中国病理生理杂志. 2008(08)
[2]ZNF580与EGFP融合蛋白表达载体的构建及其在HEK293细胞的表达和定位[J]. 张文成,孙慧燕,罗玉玉,崔明亮.  武警医学院学报. 2008(03)
[3]低密度脂蛋白诱导下调的新基因cDNA的克隆及组织表达[J]. 张文成,陈保生,曾武威,吴刚,薛红.  基础医学与临床. 2003(03)



本文编号：3317101