西格列汀对高糖诱导下人脐静脉内皮细胞自噬及AMPK/mTOR信号通路的影响

发布时间：2021-08-02 18:18

　　目的:1、建立高糖诱导人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）损伤模型,并用不同浓度的西格列汀对其进行干预,观察西格列汀对其自噬水平的影响;2、探讨西格列汀调控自噬与AMPK/mTOR信号通路之间的关系。材料与方法:将复苏后的HUVEC用完全培养基接种于细胞培养瓶中,并在37℃、5%CO₂的培养箱中培养,选取对数增长期的HUVEC为实验研究对象。1、不同剂量西格列汀对高糖诱导下HUVEC自噬的影响:实验分成以下6组:A组:正常对照组（5.5mmol/L）,B组:甘露醇组（25 mmol/L）,C组:高糖组（30 mmol/L）,D组:高糖+西格列汀0.1μmol/L组,E组:高糖+西格列汀1μmol/L组,F组:高糖+西格列汀10μmol/L组。观察指标:⑴细胞形态学改变;⑵硝酸还原酶法测定细胞培养上清液中的NO含量;⑶Western Blot检测各组AMPK、p-AMPK、p70S6K、p-p70S6K、LC3-II、p62蛋白的表达;2、探讨AMPK/mTOR信号通路在西格列汀诱导HUVEC自... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

六组HUVEC细胞形态学改变（200X）

而 B 组与 A 组比较，NO 含量无明显差异。根据 C 组细胞形态学及 NO 含量的改变提示高糖诱导 HUVEC 损伤模型建立。图3.2 六组HUVEC一氧化氮（NO）含量比较（ x±s，n=3）注：A group：正常对照组，B group:甘露醇组，C group：高糖组，D group：高糖+西格列汀0.1μmol/L组，E group：高糖+西格列汀1μmol/L组，F group：高糖+西格列汀10μmol/L。a：与A组比较，P＜0.05；c：与C组比较

p-AMPK 64kDβ-actin 42kD图3.3 六组HUVEC的AMPK、p-AMPK、p70S6K、p-p70S6K及自噬相关蛋白的表达注：A group：正常对照组，B group:甘露醇组，C group：高糖组，D group：高糖+西格列汀0.1μmol/L组，E group：高糖+西格列汀1μmol/L组，F group：高糖+西格列汀10μmol/L。

【参考文献】：
期刊论文
[1]西格列汀对AGEs作用下系膜细胞自噬的影响[J]. 江颖娟,蒋作锋,吴小兰,黄珮,吴文法,余慧文.  中国病理生理杂志. 2017(08)
[2]自噬对糖尿病慢性并发症的影响[J]. 屈岭,梁晓春.  基础医学与临床. 2013(05)
[3]AMPK与心血管疾病关系研究进展[J]. 刘宇坦,刘怡希,李为民.  国际心血管病杂志. 2013(02)

博士论文
[1]DPP4抑制剂西格列汀对动脉粥样硬化的影响及其机制探讨[D]. 曾艳梅.南方医科大学 2014

硕士论文
[1]西格列汀对糖尿病大鼠大血管病变自噬水平的影响及其机制研究[D]. 李玫.南华大学 2018
[2]黄癸固体分散体调节AMPK通路对糖尿病视网膜病变的保护作用研究[D]. 阎鑫.吉林大学 2017
[3]DPP4抑制剂对内皮细胞凋亡的调控作用及机制研究[D]. 吴超.第三军医大学 2016
[4]二甲双胍联合Bevacizumab对大鼠糖尿病视网膜病变的作用及其对VEGF和pAMPK表达的影响[D]. 于洋.辽宁医学院 2015
[5]α-硫辛酸对糖尿病大鼠糖脂代谢、氧化应激水平以及AMPK活性的影响[D]. 李艳英.山东大学 2010



本文编号：3318046