腺相关病毒介导的mir-19a表达与大鼠肺动脉高压形成的相关性研究

发布时间：2021-08-02 20:47

　　目的:通过SD大鼠左肺全切建立肺动脉高压模型,寻找能将miR-19a有效转导入肺动脉的方法,研究miR-19a差异性表达对大鼠肺血管重建及肺高压形成程度的影响,明确mi R-19a与VEGF、BMPR2的调控关系,从而探讨出诊断及治疗动脉型肺动脉高压的潜在靶点及手段。方法:1)建立左侧肺叶全切除肺动脉高压SD大鼠模型,使用腺相关病毒载体携带miR-19a并经气管导管导入大鼠肺动脉,第三周行快速冰冻切片,观察肺动脉绿色荧光蛋白表达（eGFP）,第八周时行qRT-PCR监测miR-19a含量;2)30只6-8周龄雄性SD大鼠,随机均分为5组,每组6只,C为正常对照组,行假手术;P0组行单纯左侧肺叶全切除手术;P1组行左侧肺叶全切除手术,并在术毕时通过气管导管滴入过表达mi R-19a腺相关病毒病毒（AAV）,滴度为1*10¹² v.g./ml;P2组行左侧肺叶全切除手术,并在术毕通过气管导管注入等量载有miR-19a封闭序列的AAV;P3组行左侧肺叶全切除手术,并在术毕通过气管导管注入等量的空载AAV。饲养8周后,测各组平均肺动脉压力（mPAP）,并处死动物取肺组织做... 

【文章来源】：西南医科大学四川省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

1插管通气后消毒

松解左下肺韧带后，用眼科镊牵拉出左全肺组织，显露肺门，结扎，切除左肺全叶。（图2.1.2,图 2.1.3）试水实验无漏气，查无渗血，逐层关胸。术毕恢复正常体位，呼吸机继续予以支持 60 分钟，待大鼠痛觉反射恢复，自主呼吸恢复，进行下一步操作。术后皮下注射青霉素（用 N.S 配 8 万单位，0.1ml/只），以预防感染。对照 C 组仅单纯开胸，同样注射青霉素。图 2.1.1 插管通气后消毒 图 2.1.2 牵拉左肺，结扎肺门 图 2.1.3 切下左肺组织

气管导管（50ml 空针针头磨钝后使用）放入口腔，沿着舌根往内深入，对准声门，吸气相时将轻柔气管导管导入气道，若进入气管向下插时可感觉导管与气管软骨环的特殊摩擦感，固定导管并连接呼吸机（潮气量 15ml/kg，呼吸频率 80 次/分，吸呼比 1:1.5-2.0），可见胸廓随之起伏。取右侧卧位，消毒手术区域（图 2.1.1），沿着左侧第 3 肋间后外侧 1.0cm 的切口切开皮肤，逐层分离胸前肌及肋间肌，进入胸腔后，减小潮气量，松解左下肺韧带后，用眼科镊牵拉出左全肺组织，显露肺门，结扎，切除左肺全叶。（图2.1.2,图 2.1.3）试水实验无漏气，查无渗血，逐层关胸。术毕恢复正常体位，呼吸机继续予以支持 60 分钟，待大鼠痛觉反射恢复，自主呼吸恢复，进行下一步操作。术后皮下注射青霉素（用 N.S 配 8 万单位，0.1ml/只），以预防感染。对照 C 组仅单纯开胸，同样注射青霉素。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3318249