法尼基焦磷酸合成酶在小鼠心肌重塑中的作用及机制研究

发布时间：2021-08-02 23:19

　　背景:心肌重塑是在持久性病理应激作用下心脏功能从代偿期向失代偿期演变、心脏结构从可逆转向不可逆转发展的一个阶段。可表现为心肌细胞肥大、非肌性细胞（主要是心肌成纤维细胞）增殖及心肌纤维化,继而出现心腔扩张与心脏重量增加,是多种心肌损伤的共同结局。心肌重塑的发生最终会导致心力衰竭、心律失常、心脏性猝死。甲羟戊酸途径（MVA）是哺乳动物细胞体内胆固醇合成的唯一途径,其除了参与胆固醇合成之外还与蛋白质的异戊二烯化有关。研究表明甲羟戊酸途径关键酶在自发性高血压大鼠和压力超负荷大鼠心肌重塑中异常表达,提示MVA关键酶可能在心肌重塑过程中具有重要的作用。法尼基焦磷酸合成酶（FPPS）位于MVA的分支点,在转运小G蛋白过程中起着极其重要的作用,对维持心肌细胞的功能至关重要。因此,FPPS表达失调可导致病理性心肌肥大。目的:本研究利用心肌特异性FPPS基因敲除模型来进一步阐明FPPS在心肌重塑中的作用及其潜在的分子机制。方法:（1）构建心肌特异性FPPS敲除小鼠模型。（2）使用real-time PCR、Western Blot等手法检测心肌特异性敲除效率。（3）确定敲除后,在不同的年龄阶段使用超声心动... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

心肌特异性敲除FPPS小鼠的产生

3.2 心脏组织中的 GPP,FPP,GGPP 及胆固醇水平 FPPS 催化 FPP 和 GGPP 的合成，并且是甲羟戊酸途径中的关键酶。此外，FPP和 GGPP 对于小 G 蛋白锚定到细胞内膜并引导其定位和激活至关重要。为了进一步研究 FPPS 缺失后，对异戊二烯化的影响，我们取了小鼠心肌组织，检测GPP,FPP,GGPP 以及胆固醇的含量。高效液相色谱分析结果显示 GGPP 和 FPP 含量显著降低，而 GPP 水平相对于野生型小鼠有所提高（图 2.1）。心肌组织中胆固醇的含量没有明显改变（图 2.2）。

浙江大学硕士学位论文实验结果15图2.2FPPS敲除后心肌组织的胆固醇含量没有明显改变3.3FPPS敲除后小鼠的心脏体重比增加我们分别在1，2，3，4月记录了小鼠的心重和体重。结果显示，随着年龄的增长，小鼠的体重均不断增长(图3A,B)。而心脏体重比从第二个月开始出现差异，之后的比值逐渐增大（图3C,D），性别没有差异。图3小鼠出生后的体重以及心脏体重比（A）（B）不同性别小鼠出生后1-4月龄的体重变化；（C）（D）不同性别


本文编号：3318462