DPP-4i/GLP-1对实验性肺动脉高压的作用及其机制研究

发布时间：2021-08-11 12:38

　　二肽激酶4（Dipeptidyl peptidase IV,DPP-4）,别名T细胞表面抗原CD26,在机体血糖调控中扮演重要角色,抑制DPP-4（DPP-4 inhibition,DPP-4i）活性可在体循环系统疾病中发挥多种保护作用,包括改善左心功能、抑制心血管重塑、降低损伤后新生内膜形成、增强内皮依赖性血管舒张、以及降低体循环压。胰高血糖素样肽1（Glucagon-like peptide-1,GLP-1）是一种胰源性激素能被DPP-4能剪切,从而失活。GLP-1除在调控机体胰岛素/血糖水平过程中具有重要作用,同样被证实参与调节心血管功能/组织重塑,包括改善血管内皮功能、降低血管平滑肌细胞增殖、抑制心肌细胞凋亡、减轻心血管系统验证反应、舒张血管降低体循环压。在内分泌功能障碍中,GLP-1主要介导了DPP-4i的调控血糖生物功能,在心血管系统疾病中,GLP-1同样被作为介导DPP-4i心血管活性的重要分子。然而,DPP-4i对肺动脉高压（pulmonary hypertension,PH）的改善作用及其相关机制至今尚未阐明;GLP-1是否介导DPP-4i对PH肺血管重塑的作用需进一... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：111 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

DPP-4（二肽激酶4）在大鼠及人肺组织分布特征

图 3.DPP-4 抑制剂（西格列汀，SG）对野百合碱诱导的肺动脉高压（MCT-PH）大鼠右心室收缩压（RVSP）的作用。（A）DPP-4 抑制剂能浓度依赖性抑制 MCT 诱导的 RVSP升高；（B）DPP-4 抑制剂能改善 MCT-PH 大鼠体重；（C）DPP-4 抑制剂能浓度依赖性降低 MCT-PH 大鼠外周血 DPP-4 含量。结果以 mean ±s.e.m 形式呈现。(n = 6-8)。*P <0.05 v.s. control; **P < 0.01 v.s. control;#P < 0.05 v.s. MCT;##P < 0.01 v.s. MCT。DPP-4 抑制剂对 MCT-PH 大鼠肺血管内皮细胞间充质化（EndMT）的作用近五年，EndMT 被证实是 PH 患者肺组织血管重塑的一个新的重要病理结构改变，表现为内皮细胞向间充质细胞转化，内皮细胞标志物（例如 CD31）表达下降，同时表达间充质细胞标志物（例如 α-SMA）且逐渐升高。本实验借助 CD31（红色）和 α-SMA（绿色）免疫组织荧光双标实验标记 CD31 & α-SMA 双阳性（黄色）细胞（即发生间充质化内皮细胞），结果显示：MCT 组大鼠肺血管内膜区域发现少许发生 EndMT 的内皮细胞（图 4，白色箭头），而对照组、不同浓度给药组肺组织内 EndMT 现象相对少见，考虑到目前尚未有公认的通过免疫荧光方法分析评估 EndMT 的算法，本实验未对免疫荧光结果半定量分析。

DPP-4 抑制剂对 MCT-PH 大鼠肺组织内 EndMT 标志物表达的作用为了能定量分析 DPP-4 抑制剂对 MCT-PH 肺血管 EndMT 的影响，我们提取了不同组别大鼠肺组织总蛋白来检测内皮细胞标志物和间充质细胞标志物表达，以便间接反映 EndMT 水平。研究结果显示，MCT 处理 28 天后，肺组织内间充质细胞标志物 α-SMA 蛋白表达显著升高，而内皮细胞标志物 vWF 蛋白显著下降，在给予不同浓度西格列汀干预后，上述改变得到有效抑制。其中，α-SMA在给药组（40 mg/kg 和 80 mg/kg）时与 MCT 组间的差异具有统计学意义，vWF在给药组（80 mg/kg）时与 MCT 组间的差异具有统计学意义（图 5A）。为了进一步验证上述结果，我们提取了不同组别大鼠肺组织总 mRNA。RT-qPCR 检测结果显示，间充质细胞标志物 vimentin 和 fibronectin 在 MCT 组显著升高，在给予不同浓度西格列汀（20 mg/kg、40 mg/kg、80 mg/kg）干预后显著下降，且与MCT 组间的差异均具有统计学意义（图 5B）。


本文编号：3336174