益气养阴清热化瘀方调节Th17/Treg平衡治疗免疫性血小板减少症作用机制的研究

发布时间：2021-09-06 10:50

　　目的:通过构建ITP小鼠模型,明确益气养阴清热化瘀方对ITP的治疗效果并对各组小鼠外周血Th17、Treg细胞的比值、脾脏中Th17、Treg相关转录因子及外周血Th17、Treg相关细胞因子的水平进行检测分析。探讨该方在ITP中发挥治疗作用的最佳有效剂量与可能的作用靶点,为临床治疗ITP提供相应的理论依据。方法:1.ITP小鼠模型的建立及评估:将健康雌性BALB/C小鼠随机分为正常组（n=20）,ITP模型组（n=110）,采用针对血小板表面膜糖蛋白GPIIb/IIIa的被动免疫法,将模型组小鼠腹腔注射含2μg大鼠抗小鼠CD41单克隆抗体（MWReg30单抗）的磷酸盐缓冲液200μl,造成持续的血小板减少症,建立ITP小鼠模型。正常组则采用同样的方式注射等量生理盐水。造模开始第1、3、5、7天通过检测外周血小板计数并结合骨髓巨核细胞象进行模型评估。2.益气养阴清热化瘀方对ITP模型的药效学研究:实验第8天将ITP模型组再次随机分为模型组、合方（益气养阴清热化瘀方）低、中、高剂量组、西药对照组（以醋酸泼尼松对照）（n=20）,各治疗组按给药剂量进行药物干预2周,观察各组小鼠一般状况的改... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

ITP小鼠模型的建立

中药中剂量组 966.33±62.32☆☆中药高剂量组 876.30±39.58☆组相比：△P＜0.05；与模型组相比：☆P＜0.05，☆☆P＜：* P＜0.05阴清热化瘀方对 ITP 模型骨髓巨核细胞的影响胞成熟障碍是 ITP 特有的骨髓象病理改变。如图 2 所可见成熟产板的巨核细胞：胞质呈均匀粉紫色，质内充粒及血小板，胞膜呈伪足状，其内侧及外侧可见血小板髓象可见大量幼稚巨核细胞，呈裸核及小巨核细胞表现、扭转，核染色质呈粗颗粒状，排列紧密，可见核仁或色，近核处出现少量天青蓝颗粒。各治疗组小鼠骨髓巨及幼稚巨核细胞的数量均有所减少，以合方中剂量组更

图 3 三明治夹固定顺序示意图将反应膜再次用 1×TBST 在 37℃下，洗涤 3 次×10 min洗片：用保鲜膜将 PVDF 膜封好，放置在暗盒中。X 胶影、定影；ge J 软件分析灰度值。 检测 Th17、Treg 细胞转录因子水平样本总 RNA取组织样本中总 RNA。实验操作步骤如下：磨组织样品，后加入至含有 1 ml Trizol 的离心管中，漩 37 ℃下静置 8 min； ml 氯仿，剧烈混匀 30 s，静置于冰盒上 3 min；2,000 rpm 离心 15 min 混合物将分离为两相，使 RNA 留水相置入另一 EP 管中；

【参考文献】：
期刊论文
[1]加味归脾合剂治疗慢性免疫性血小板减少症气虚证临床研究[J]. 朱小勤,黄中迪,邱仲川,陈珮,赵琳,胡晓莹,瞿玮颖,陆颖佳.  山东中医杂志. 2017(12)
[2]消斑饮治疗原发免疫性血小板减少症119例临床观察[J]. 苏尔云,赵毅,黄丽华,赵安娜.  中国中西医结合杂志. 2017(02)
[3]浅析免疫性血小板减少症的中医药治疗[J]. 刘文静.  中国中医药现代远程教育. 2017(03)
[4]健脾益气摄血方联合吗替麦考酚酯治疗原发性免疫性血小板减少症疗效观察[J]. 林建锋,易仕青,杨志远,黄群峰,林燕霞.  现代中西医结合杂志. 2016(35)
[5]不同剂量通脉止血方辅助治疗血小板减少性紫癜的安全性与有效性分析[J]. 王海燕,王华,姚召,赵莉,耿少怡,焦平.  时珍国医国药. 2016(11)
[6]滋阴和阳法治疗激素无效血小板减少性紫癜临床研究[J]. 季菲,肖海燕,胡晓梅.  时珍国医国药. 2016(01)
[7]凉血解毒方联合小剂量泼尼松龙治疗原发性血小板减少性紫癜的临床研究[J]. 刘伟,刘晓莺,叶绥艳.  中医药导报. 2015(24)
[8]升血小板胶囊联合泼尼松对原发免疫性血小板减少症患者Treg细胞和Th17细胞的影响[J]. 向琪,杨方方,王顺清,刘敏涓.  血栓与止血学. 2015(06)
[9]牛角地黄汤对ITP大鼠外周血细胞因子IL-10和TGF-β1的影响[J]. 聂甜,蒋文明,彭素娟,张旻昱,杨琳,李仕能,胡妮.  中医药导报. 2015(10)
[10]升血小板胶囊对免疫性血小板减少性紫癜CD4+CD25+Treg细胞的影响[J]. 何牧卿,何牧群,郭文坚.  中华中医药学刊. 2015(02)



本文编号：3387321