类风湿关节炎合并慢性病贫血患者血清铁调素与转铁蛋白水平的测定及意义

发布时间：2021-09-18 14:30

　　目的：通过测定类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）合并慢性病贫血（anemia ofchronic disease,ACD）患者、RA患者及健康受试者血清铁调素（hepcidin,Hepc）及转铁蛋白（transferrin,Tf）的水平，进一步研究Hepc、Tf的水平与RA患者疾病活动度28（disease activity score in28joints,DAS28）与血红蛋白（hemoglobin,Hb）水平的相关性，从而探讨RA合并ACD发生的可能机制。方法：分别用双抗体夹心酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）、免疫散射比浊法测定22例RA合并ACD患者、27例RA患者及24例健康对照受试者血清Hepc及Tf水平。结果：（1）RA合并ACD组患者、RA组患者血清Hepc水平均明显高于健康对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；RA合并ACD组患者血清Hepc水平高于RA组患者，差异有统计学意义（P＜0.05）；（2）RA合并ACD组患者、RA组患者血清Tf水平均明显低于健康对照组，差... 

【文章来源】：青海大学青海省 211工程院校

【文章页数】：40 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1双抗体夹心酶联免疫吸附法示意图

实验操作步骤：①向反应孔中加入稀释好的标准品 50ul，并加入 50ul 待测血清，随即加入50ul 生物素标记的抗体。盖上膜板后轻轻振荡混匀，在 37℃温育 1 小时。②甩去孔内液体后在每孔加满洗涤液，并振荡 30 秒，再甩去洗涤液并用吸水纸拍干。重复此操作 3 次。③向每孔加入亲和链霉素-HRP60ul，轻轻振荡混匀，在 37℃温育 30 分钟。④甩去孔内液体，向每孔加满洗涤液并振荡 30 秒，再甩去洗涤液并用吸水纸拍干。重复此操作 3 次。⑤向每孔加入底物 A 和底物 B 各 50ul，轻轻振荡混匀，在 37℃温育 10分钟。避免光照。⑥取出酶标板，迅速加 50ul 终止液并立即测定结果。⑦在 450nm 波长处测定各孔的吸光度 OD 值。质量控制：本实验严格按说明书操作，相关系数为 r=0.9982，质量控制良好。标准曲线见图 2。

图 3 免疫散射比浊法示意图实验前准备：①取出标本置于室温使其自然融化，并在 15000×g 下离心 10min 以澄清血清；②建立仪器参考曲线；③检测 N/T 蛋白质控 SL/L、M 和 H。实验步骤：①将 N 抗血清开封；②将血清样本加入仪器，样本将自动被 N 稀释液稀释成 1:20 并进行测量；③BN 系统将自动计算并打印出以 g/L 为单位的血清中 Tf 的浓度结果。实验质控：本实验严格按照说明书操作，在使用抗血清之前建立新的参考曲线，并检测 N/T 蛋白质控 SL/L、M 和 H。定值和置信区间列于相应质控项目的定值表中。

【参考文献】：
期刊论文
[1]Hepcidin与疾病关系和其临床意义的研究进展[J]. 牛诗雯,宁波,刘罡,魏景艳,聂广军.  生命科学. 2012(08)
[2]铁调素的表达与调节机制[J]. 刘树欣,卢红梅,刘玉倩,王海涛,康红哲,李文惠,陈军.  中国组织工程研究与临床康复. 2010(41)
[3]慢性病贫血的分子机制研究进展[J]. 郭晓强.  新医学. 2008(12)
[4]hepcidin:连接免疫和铁代谢的桥梁[J]. 苗巍,底晓静,段相林,常彦忠.  中国免疫学杂志. 2007(11)
[5]慢性病贫血铁代谢指标测定的诊断价值[J]. 胡凯,刘俊峰.  中国热带医学. 2007(07)
[6]老年人巨幼细胞性贫血的特点[J]. 梁月雄,蔡成才.  中山大学学报(医学科学版). 2005(S1)
[7]Hepcidin与慢性病贫血分子发病机制[J]. 高举.  实用儿科临床杂志. 2004(05)
[8]Hepcidin和铁稳态[J]. 常彦忠,段相林,钱忠明.  中华内分泌代谢杂志. 2003(06)
[9]小肠铁吸收机制及相关疾病研究进展[J]. 蒋达和,钱忠明.  中华医学杂志. 2001(24)
[10]慢性病性贫血的识别[J]. 单渊东,张之南.  中华内科杂志. 1995(12)



本文编号：3400309