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TAK1在IL-17上调心肌细胞MCP-1表达中的作用

发布时间:2021-09-23 18:12
  IL-17是重要的促炎细胞因子之一,在多种炎性反应及自身免疫性疾病病理过程中具有重要作用。单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein,MCP-1)作为单核/巨噬细胞的主要趋化和激活因子,介导单核细胞向心肌组织的迁移,促进病毒性心肌炎(Viral myocarditis,VMC)的发生发展。IL-17能够通过上调MCP-1的表达加重VMC心肌损伤,但其具体分子机制尚未完全阐明,如果能够减少IL-17诱导下MCP-1的表达对于减轻VMC的病变很有意义。小鼠MCP-1启动子区存在NF-κB、AP-1等转录因子结合位点,我们前期发现,在心肌细胞中IL-17可磷酸化NF-κB p65激活NF-κB上调MCP-1的表达,此外IL-17还可通过Act1/TRAF6/MAPK信号通路激活AP-1上调MCP-1的表达。但是,关于NF-κB和AP-1之间是否存在某种枢纽分子既能影响NF-κB的激活,又能调控AP-1,从而在IL-17上调心肌细胞MCP-1表达中发挥作用,目前尚不明确。转化生长因子β激活激酶1(TGF-β activated kinase-1,TA... 

【文章来源】:郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】:66 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

TAK1在IL-17上调心肌细胞MCP-1表达中的作用


图3.2不同siRNA作用下TAKl表达??Figure3.2?Effects?of?different?siRNA?sequences?on?TAK1?mRNA?expression??

浓度,转染,心肌,蛋白


?结果???好,后续采用此浓度作为转染浓度,见表3.2,图3.3。??表3.2不同浓度siRNA#3作用下TAKlmRNA表达([士SD)??Table3.2?Effects?of?different?siRNA?concentrations?on?TAK1?mRNA?expression??Control?lOnM?30nM?50nM?lOOnM??1.000?±?0.0298?0.6056士0.0519**?0.5469±0.0736*?0.3595?±?0.0437**?0.4242±0.0543**??*尸<0.05,?**尸<0.01?vs?Control??5?1.5-1??(/>??I?1.0-??lilllil??图3.3不同浓度siRNA作用下TAK1表达??Figure3.3?Effects?of?different?siRNA?concentrations?on?TAK1?mRNA?expression??注:*尸<0.05,**?<0.01?vs?control?group??3.2.3?TAKl基因沉默效果的评价??小鼠心肌细胞转染si-NC或si-TAKI,?48h后Western?blot检测TAK1蛋白的??表达。结果显示:与转染si-NC组相比,心肌细胞转染si-TAKl#2和si-TAKl#3??可以明显降低TAK1的表达水平(P<0.05),转染si-TAKl#3组TAK1蛋白表达??降低更明显(尸<〇.〇〇,如图3.4。??19??

心肌,细胞,蛋白,转染


?结果???T?8"|?[=3?si-NC?衫??〇?■■?SI-TAK1?J1?1??S?工??〇?6-??<A??O??^?4-?t??I??I2'?)??IJ?n.___M,_??Medium?IL-17??图3.5心肌细胞中MCP-lmRNA表达??Figure3.5?MCP-1?mRNA?expression?in?cardiac?myocytes??3.3.2?TAKl在IL-17诱导心肌细胞MCP-l蛋白表达中的作用分析??心肌细胞转染si-NC或si-TAKl后,ELISA检测MCP-1蛋白的表达。转染??si-TAKl组与si-NC组比较,MCP-1蛋白表达明显降低(P<0.01),加入IL-17??(50ng/mL)后,MCP-1蛋白表达明显增加(尸<0.01)。IL-17+si-TAKl组与??IL-17+si-NC组相比,MCP-1蛋白表达明显降低(P<0.01),见表3.4,图3.6。??表3.4心肌细胞MCP-1蛋白表达(hSD)?(pg/mL)??Table3.4?MCP-1?expression?in?cardiac?myocytes?(?x±SD)?(pg/mL)??si-NC?si-TAKl?IL-17+si-NC?IL-17+si-TAKl??532.90±19.84?291.80?±?24.71**?1301.02?±?71.83?741.50?±?49.60**??**?尸?<0.01??1500-1?*—*?si-NC?l ̄—I??■?s!-TAK1?丁??3?r-H??E??O)??s?1000-??I?^?i??1J


本文编号:3406176

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