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Apelin分子在人脐带间充质干细胞定向心肌分化中的调控作用研究

发布时间:2021-10-11 05:37
  目的:体外分离培养人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-MSCs,hUC-MSCs),并制备携带siRNA-apelin、apelin标记基因的慢病毒载体转染的hUC-MSCs。方法:组织块贴壁培养法培养hUC-MSCs,流式细胞仪测定hUC-MSCs表面免疫标记、成骨、成脂细胞诱导分化;将构建的apelin-siRNA、apelin基因慢病毒载体转染P3代hUC-MSCs,实验分为干扰组、空白组和过表达组。转染后第4天采用RT-PCR(real time-photo conductive relay,RT-PCR)、western-blot方法检测靶基因apelin的抑制、过表达效果。结果:流式细胞仪鉴定结果表明:hUC-MSCs表达CD44、CD90、CD105、CD73、HLA-ABC,不表达CD34、CD45、HLA-DR;组织化学染色显示茜素红、油红染色阳性。RT-PCR检测示空白组apelin mRNA的表达是干扰组的16.60±2.30倍;过表达组apelin mRNA的表达是空白组的1.59±0.10倍。western-blot显示:过表达组的细... 

【文章来源】:安徽医科大学安徽省

【文章页数】:60 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
英文缩略词表
中文摘要
Abstract
前言
    参考文献
第一部分 携带 siRNA-apelin、apelin 基因的慢病毒载体转染人脐带华通胶间充质干细胞
    1 实验材料
    2 实验方法
    3 结果
    4讨论
    参考文献
第二部分 apelin对脐带间充质干细胞向心肌细胞分化的影响
    1 材料和方法
    2 实验方法
    3 实验结果
    4 讨论
    参考文献
附录
致谢
综述
    参考文献


【参考文献】:
期刊论文
[1]慢病毒载体介导apelin基因转染人脐带间充质干细胞的实验研究[J]. 王力,张宁坤,徐小红,郑楠,高连如,朱智明.  天津医药. 2013(12)
[2]Apelin-13对5-Aza诱导脐带间充质干细胞向心肌细胞分化的影响[J]. 徐小红,王力,张宁坤,郑楠,高连如,朱智明.  解放军医学杂志. 2013(10)
[3]基于miR30骨架的HPSE-shRNA慢病毒载体的构建及其效应研究[J]. 刘晓艳,方红,朱定仙,张妤.  浙江大学学报(医学版). 2013(01)
[4]基因修饰干细胞治疗缺血性心脏病的现状与前景[J]. 姚永钊,马翔.  中国组织工程研究与临床康复. 2011(40)
[5]力学拉伸对经5-氮胞苷诱导的间充质干细胞向心肌细胞分化的影响[J]. 郭勇,张西正,李瑞欣,张春秋,郭春,张彦军,闫玉仙.  医用生物力学. 2009(S1)
[6]不同诱导条件对体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的影响[J]. 王梦洪,文渊,谢安,汪泱,张智亮,黄俊.  中国组织工程研究与临床康复. 2007(42)
[7]丹参诱导人脐血间充质干细胞分化为神经样细胞[J]. 马廉,冯学永,杨立业,谢庆东,罗敏洁,黄天华.  实用儿科临床杂志. 2005(11)
[8]二甲亚砜诱导人骨髓基质干细胞心肌分化中的基因表达[J]. 史剑慧,胡昕婴,牛玉宏,葛均波.  复旦学报(医学版). 2004(05)



本文编号:3429894

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