大麻素受体2在油酰乙醇胺抗动脉粥样硬化中的作用

发布时间：2021-10-23 02:47

　　动脉粥样硬化（atherosclerosis, AS）是一种严重危害人类健康的复杂血管炎性疾病,当前针对抗动脉粥样硬化药物的研究主要通过调血脂、抗炎、抗氧化等方面进行。有较多实验证据支持了PPAR-α在抗动脉粥样硬化方面的作用,近年来研究显示大麻素受体系统与动脉粥样硬化之间有密切关系。已有研究表明PPAR-α激动剂油酰乙醇胺（N-oleoylethanolamine, OEA）在调血脂方面有显著的作用。本实验室前期研究显示,OEA能够减轻TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞黏附分子表达。但其作用是否单纯通过PPAR-α通路产生还未明确。研究显示大麻素受体2（Cannabinoid receptor2, CB2）在抗动脉粥样硬化中表现出一定的潜力,抗动脉粥样硬化作用可能是由于其抗炎作用实现的。本文主要研究OEA对人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells, HUVEC）抗炎相关受体大麻素受体2的作用。本实验从新生儿脐带中提取HUVECs。用ELISA法和细胞黏附实验检测PPAR-α阻断剂对OEA抗黏附的作用。给予HUVECs不同剂量OEA,... 

【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 、前言
    一、动脉粥样硬化概述
        1.1.1 动脉粥样硬化发病影响因素
        1.1.2 动脉粥样硬化发病机制
        1.1.3 抗动脉粥样硬化药物
    二、PPAR-α及其配体
        1.2.1 PPAR-α简介
        1.2.2 PPAR-α的结构
        1.2.3 PPAR-α的功能
    三、OEA简述
        1.3.1 OEA来源
        1.3.2 OEA的生物合成
        1.3.3 OEA的水解
    四、大麻素受体家族简述
    五、立题依据
第二章 、人脐静脉内皮细胞的培养与鉴定
    一、脐静脉内皮细胞分离提取
        2.1.1 实验仪器及部分实验试剂
        2.1.2 主要试剂配制
        2.1.3 脐静脉内皮细胞提取器材的准备
        2.1.4 人脐静脉内皮细胞的分离提取
    二、人脐静脉内皮细胞Ⅷ因子检测
        2.2.1 实验方法
        2.2.2 实验结果
    三、本章小结
第三章 、OEA对人脐静脉内皮细胞表面黏附分子表达及功能的影响
    一、实验仪器和部分试剂
    二、酶联免疫吸附实验
    三、普通PCR及REALTIMEPCR实验
    四、细胞黏附实验
    五、统计学处理
    六、实验结果
        3.6.1 OEA对TNF-α诱导的HUVEC黏附的影响
        3.6.2 PPAR-α阻断剂MK886对OEA抗黏附的影响
        3.6.3 PPAR-α阻断剂MK886对细胞表面VCAM-1蛋白表达影响
        3.6.4 不同浓度OEA对TNF-α诱导的HUVEC E-Selectin表达的影响实验结果
    七、本章小结
第四章 、不同浓度OEA对人脐静脉内皮细胞CB2表达的影响
    一、实验仪器和部分试剂
    二、主要试剂的配制
    三、WESTERN BLOT实验方法
    四、PCR实验方法
        4.4.1 不同浓度OEA对人脐静脉内皮细胞CB2 mRNA表达的影响
        4.4.2 mRNA的提取
        4.4.3 引物设计和合成
        4.4.4 逆转录合成cDNA步骤
        4.4.5 聚合酶链式反应(PCR)
    五、实验结果
        4.5.1 OEA对人脐静脉内皮细胞CB2 mRNA表达的影响
    六、WESTERN BLOT实验方法
        4.6.1 不同浓度OEA对人脐静脉内皮细胞CB2蛋白表达的影响
        4.6.2 总蛋白的提取
        4.6.3 BCA法测定蛋白浓度
        4.6.4 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
        4.6.5 统计学处理
    七、实验结果
        4.7.1 OEA对人脐静脉内皮细胞CB2蛋白表达的影响
    八、本章小结
第五章 、AM630对OEA抑制TNF-A诱导的HUVECS VCAM-1表达的影响
    一、实验仪器和部分试剂
    二、实验方法
    三、实验结果
    四、本章小结
第六章 、CB2拮抗剂AM630对OEA抗黏附的影响
    一、部分实验仪器和试剂
    二、THP-1细胞培养
    三、细胞黏附实验
    四、实验结果
    五、本章小结
第七章 、结论与展望
缩略语表
参考文献
在学期间发表的主要学术论文目录
致谢



本文编号：3452325