负载BIO纳米胶束促进ADSCs对急性心肌梗死的治疗作用及其机制
发布时间：2021-11-17 16:15
急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）是一种常见的心血管疾病,发病率和死亡率都较高,严重危害人类生命健康。目前临床上主要采用药物和介入等方法治疗心肌梗死,但只能缓解症状,不能修复受损心肌组织。近年来,干细胞移植治疗受到广泛关注,其中脂肪来源干细胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）是一种从脂肪组织中提取出来并具有多向分化潜能的成体干细胞,数量多、易获取、成本低、增殖快,而且自体可取,无免疫排斥反应之忧,是用于修复心肌梗死的理想干细胞之一。然而,由于心肌梗死后心肌组织缺血缺氧产生氧化应激,导致微环境恶劣,移植后干细胞的存留和存活率普遍较低,总体治疗效果不理想。因此,利用药物提高干细胞活力、增加其抗氧化能力,或者利用生物材料支架防止干细胞弥散、并为其提供良好的三维生长微环境,进而提高移植后干细胞的存活和存留率,是提高心肌梗死疗效的重要策略。（2’Z,3’E）-6-溴靛玉红-3’-肟（（2′Z,3′E）-6-Bromoindirubin-3′-oxime,BIO）是一种具有细胞渗透性的小分子物质,可以促进哺乳动物心肌细胞...
【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校
【文章页数】：109 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
流式细胞仪检测ADSCs表面标志物CD34、CD45表达阴性，CD29、CD90表达阳性
负载BIO纳米胶束促进ADSCs对急性心肌梗死的治疗作用及其机制-27-2.ADSCs具有成脂、成软骨和成骨分化能力ADSCs是一种具有多向分化能力的成体干细胞，为了鉴定提取的ADSCs是否具有多向分化能力，采用成脂、成软骨和成骨三种不同的诱导分化培养基进行诱导分化。ADSCs成脂诱导分化7天后，采用油红O染色，如图1-2A、B所示，诱导的ADSCs逐渐变成脂肪空泡，内部含有透亮的脂滴，而对照组无明显变化，说明ADSCs在成脂诱导分化培养基的诱导下，可以向脂肪细胞分化。ADSCs成软骨诱导分化结束后，采用阿利辛蓝染色，如图1-2C、D所示，诱导的ADSCs含有蓝色结节，是软骨特异性物质——内酸性粘多糖，而对照组无明显变化，说明ADSCs在成软骨诱导分化液的诱导下，可以向软骨细胞分化。ADSCs成骨诱导分化结束后，利用茜素红染色，如图1-2E、F所示，诱导的ADSCs形成大量的橘红色钙化结节，而对照组无明显变化，说明ADSCs在成骨诱导分化培养基的诱导下，可以向骨细胞分化。因此，结果表明本实验提取的ADSCs具有多向分化能力，能够向脂肪细胞、软骨细胞和骨细胞分化。图1-2ADSCs成脂、成软骨和成骨分化A和B：油红O染色，A为对照组，未见红色脂滴，B图可见大量的脂肪空泡和脂滴，ADSCs向脂肪细胞分化。C和D：阿利辛蓝染色，C为对照组，无蓝色结节，D图蓝色结节为软骨组织中的内酸性粘多糖，ADSCs向软骨细胞分化。E和F：茜素红染色，E为对照组，无钙化结节，F图可见橘红色钙化结节，ADSCs向骨细胞分化。Scalebar=100μm。
海军军医大学博士学位论文-28-（二）BIO对ADSCs的作用1.BIO促进ADSCs的增殖BIO是一种具有细胞渗透性的小分子物质，分子式如图1-3所示。BIO处理ADSCs24h，BIO（0、1、2.5、5和10μmol/L）各组之间无明显差异（图1-4A）。当BIO作用ADSCs3天后，能够明显促进ADSCs增殖，与对照组（0group）比较，BIO（1、2.5、5和10μmol/L）组的细胞增殖活力分别增长了（11.8±7.7）%、（39.9±4.2）%、（21.2±6.6）%、（8.3±13.2）%，结果显示BIO浓度过低时（1μmol/L），对ADSCs增殖效果不明显，无统计学意义；而浓度较高时（10μmol/L），作用效果也不明显；BIO对ADSCs作用有最佳浓度，2.5μmol/L和5μmol/L两组具有明显的统计学意义，其中2.5μmol/L效果最好（图1-4B）。图1-3BIO分子式图1-4BIO对ADSCs的作用CCK-8检测细胞增殖能力。A.BIO对ADSCs作用24h，各组之间无明显差异。B.BIO对ADSCs作用3天，能够促进ADSCs增殖。*P<0.05,**P<0.01vs0group。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Application of flash nanoprecipitation to fabricate poorly water-soluble drug nanoparticles[J]. Jinsong Tao,Shing Fung Chow,Ying Zheng. Acta Pharmaceutica Sinica B. 2019(01)
本文编号：3501264
【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校
【文章页数】：109 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
流式细胞仪检测ADSCs表面标志物CD34、CD45表达阴性，CD29、CD90表达阳性
负载BIO纳米胶束促进ADSCs对急性心肌梗死的治疗作用及其机制-27-2.ADSCs具有成脂、成软骨和成骨分化能力ADSCs是一种具有多向分化能力的成体干细胞，为了鉴定提取的ADSCs是否具有多向分化能力，采用成脂、成软骨和成骨三种不同的诱导分化培养基进行诱导分化。ADSCs成脂诱导分化7天后，采用油红O染色，如图1-2A、B所示，诱导的ADSCs逐渐变成脂肪空泡，内部含有透亮的脂滴，而对照组无明显变化，说明ADSCs在成脂诱导分化培养基的诱导下，可以向脂肪细胞分化。ADSCs成软骨诱导分化结束后，采用阿利辛蓝染色，如图1-2C、D所示，诱导的ADSCs含有蓝色结节，是软骨特异性物质——内酸性粘多糖，而对照组无明显变化，说明ADSCs在成软骨诱导分化液的诱导下，可以向软骨细胞分化。ADSCs成骨诱导分化结束后，利用茜素红染色，如图1-2E、F所示，诱导的ADSCs形成大量的橘红色钙化结节，而对照组无明显变化，说明ADSCs在成骨诱导分化培养基的诱导下，可以向骨细胞分化。因此，结果表明本实验提取的ADSCs具有多向分化能力，能够向脂肪细胞、软骨细胞和骨细胞分化。图1-2ADSCs成脂、成软骨和成骨分化A和B：油红O染色，A为对照组，未见红色脂滴，B图可见大量的脂肪空泡和脂滴，ADSCs向脂肪细胞分化。C和D：阿利辛蓝染色，C为对照组，无蓝色结节，D图蓝色结节为软骨组织中的内酸性粘多糖，ADSCs向软骨细胞分化。E和F：茜素红染色，E为对照组，无钙化结节，F图可见橘红色钙化结节，ADSCs向骨细胞分化。Scalebar=100μm。
海军军医大学博士学位论文-28-（二）BIO对ADSCs的作用1.BIO促进ADSCs的增殖BIO是一种具有细胞渗透性的小分子物质，分子式如图1-3所示。BIO处理ADSCs24h，BIO（0、1、2.5、5和10μmol/L）各组之间无明显差异（图1-4A）。当BIO作用ADSCs3天后，能够明显促进ADSCs增殖，与对照组（0group）比较，BIO（1、2.5、5和10μmol/L）组的细胞增殖活力分别增长了（11.8±7.7）%、（39.9±4.2）%、（21.2±6.6）%、（8.3±13.2）%，结果显示BIO浓度过低时（1μmol/L），对ADSCs增殖效果不明显，无统计学意义；而浓度较高时（10μmol/L），作用效果也不明显；BIO对ADSCs作用有最佳浓度，2.5μmol/L和5μmol/L两组具有明显的统计学意义，其中2.5μmol/L效果最好（图1-4B）。图1-3BIO分子式图1-4BIO对ADSCs的作用CCK-8检测细胞增殖能力。A.BIO对ADSCs作用24h，各组之间无明显差异。B.BIO对ADSCs作用3天，能够促进ADSCs增殖。*P<0.05,**P<0.01vs0group。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Application of flash nanoprecipitation to fabricate poorly water-soluble drug nanoparticles[J]. Jinsong Tao,Shing Fung Chow,Ying Zheng. Acta Pharmaceutica Sinica B. 2019(01)
本文编号：3501264
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