5-氮胞苷体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化

发布时间：2021-11-17 19:35

　　目的:本实验体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,并用5-氮胞苷诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化,为骨髓间充质干细胞移植治疗心肌纤维化提供良好的种子细胞。方法:（1）通过全骨髓贴壁培养法从wistar大鼠骨髓中分离骨髓间充质干细胞,在37℃5%CO₂培养箱内培养,当贴壁细胞接近大部分融合时反复传代扩增,在倒置显微镜下观察细胞情况,通过MTT法检测第2代骨髓间充质干细胞的吸光度值并绘制生长曲线,同时通过流式细胞仪测定第3代细胞表面CD29和CD45的表达。（2）取生长状态良好的第3代骨髓间充质干细胞使用不同浓度的5-氮胞苷（对照组、5umol/l、10umol/l、15umol/l）诱导24h后换液,在CO₂培养箱内培养,倒置显微镜下观察细胞形态变化,在第28天行免疫细胞化学染色检测肌钙蛋白T（cTnT）、连接蛋白-43（CX-43）、ɑ-平滑肌肌动蛋白（ɑ-SMA）的表达。结果:1.在倒置显微镜下观察原代细胞呈多边形,有集落生长的趋势,约7-10天长满至80%-90%。传代细胞逐代伸展呈长梭形,排列具有方向性,呈漩涡状生长,约4-5天传代一次... 

【文章来源】：内蒙古医科大学内蒙古自治区

【文章页数】：44 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

小时换液后（×100）

原代细胞第五天（×100）

原代细胞第七天（×100）

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3501535