HNF1b抑制sortilin表达遏制巨噬细胞脂质蓄积及主动脉粥样硬化病变

发布时间：2021-11-27 11:10

　　背景:肝细胞核因子1b（Hepatocyte nuclear factor 1β,HNF1b）是近年来备受关注的热门因子,分布于肝细胞,脂肪细胞和巨噬细胞。研究发现HNF1b减少肝脏脂质含量,抑制脂肪细胞分化和脂滴形成。目前HNF1b对巨噬细胞脂质代谢影响的研究鲜有报道,因此探讨HNF1b对巨噬细胞脂质代谢的影响显得很有必要。sortilin,由SORT1基因编码,是囊泡分拣因子10 p（vacuolar protein sorting 10p,Vps10p）结构域家族成员,参与巨噬细胞脂质代谢的调控,促进AS发生发展,但其调控机制尚不明确。前期生信分析发现HNF1b与SORT1启动子存在结合位点,提示HNF1b很可能通过靶向调控巨噬细胞sortilin表达,促进巨噬细胞胆固醇流出,抑制AS发生发展。目的:探讨HNF1b对巨噬细胞sortilin表达、胆固醇流出以及主动脉AS的影响及机制。方法:50μg/ml ox-LDL孵育THP-1源性巨噬细胞,Western blot和qRT-PCR分别测定HNF1b和sortilin蛋白及mRNA水平。Alibaba,Promo和JASPAR网... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

高脂饮食LDLR/鼠斑块内HNF1b及sortilin表达变化（40×）

17第4章实验结果4.1HNF1b和sortilin在高脂处理的LDLR/鼠及荷脂巨噬细胞中的表达免疫荧光结果显示，相比对照组，高脂组LDLR/鼠斑块中HNF1b的表达显著下降，sortilin的表达明显增加（图4.1）。50μg/mlox-LDL孵育巨噬细胞后，结果发现相比对照组，HNF1b蛋白水平明显降低，sortilin蛋白水平明显增加（图4.2和图4.3）。图4.1高脂饮食LDLR/鼠斑块内HNF1b及sortilin表达变化（40×）图4.2荷脂巨噬细胞HNF1b蛋白表达水平（*P＜0.05，与Control组比较）

18图4.3荷脂巨噬细胞sortilin蛋白及mRNA表达水平（*P＜0.05，与Control组比较）4.2HNF1b抑制荷脂巨噬细胞sortilin表达荷脂巨噬细胞中转染HNF1b及其shRNA慢病毒表达载体，Westernblot结果发现，相比对照组，高表达HNF1b后，HNF1b蛋白水平明显升高，而沉默HNF1b后HNF1b蛋白水平明显下降，说明对HNF1b蛋白表达的干预是成功的（图4.4）。进一步检测显示，与Control相比，高表达HNF1b后，sortilin的蛋白水平和mRNA水平明显下调，沉默HNF1b后sortilin的蛋白水平和mRNA水平明显增加（图4.5）。以上结果说明，HNF1b负向调控巨噬细胞sortilin蛋白表达，提示HNF1b很有可能在转录水平抑制巨噬细胞sortilin表达，但具体机制尚需进一步实验加以佐证。图4.4荷脂巨噬细胞HNF1b的表达情况（*P＜0.05，与Control组比较）


本文编号：3522163