EPO对高糖环境诱导下体外培养心脏成纤维细胞的影响

发布时间：2021-12-01 23:15

　　目的：采用分子生物学方法,以细胞水平为平台,观察促红细胞生成素（erythropoietin,EPO）对高糖环境诱导过程中体外培养的乳鼠心脏成纤维细胞（Cardiac Fibroblasts,CFs）的增殖及其表型转化的影响。方法：（1）原代细胞培养：取1-3天内SD乳鼠的心室肌,双酶消化法体外分离、培养乳鼠CFs细胞,使用贴壁较早的乳鼠心脏成纤维细胞（CFs）,培养并传代后,使用生长良好的第2-3代细胞。（2）药物干预：在促进CFs细胞表型转化的过程中,选用25mmol/L的高糖培养基进行诱导,添加20U/ml的EPO对CFs细胞进行干预,分别将同一批细胞随机分为三组：对照组（葡萄糖终浓度5.5mmol/L）、高糖组（葡萄糖终浓度25mmol/L）、高糖+EPO组（葡萄糖终浓度25mmol/L+20U/ml）.（3）免疫细胞化学法鉴定成纤维细胞：使用生长良好的CFs细胞进行细胞爬片,细胞爬片后用免疫组化SABC法进行鉴定,免疫组化结果应为Fibronectin和vimentin阳性,a-actin阴性,可被证实为心脏成纤维细胞。（4） ELISA检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原含量：采用双抗体两步... 

【文章来源】：昆明医科大学云南省

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图ICollagen[含量绘制的标准曲线

CollagenIII含量绘制的标准冊线

图1-1分离培养CFS(lOOX)

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3527238